東亞三角渦蟲(chóng)DjSLK基因的表達(dá)及功能分析.pdf

1、根據(jù)激酶結(jié)構(gòu)域的相對(duì)位置,Ste20相似激酶(SLK)可分為P21激活激酶(PAK)和生發(fā)中心激酶(GCK),P21激活激酶和生發(fā)中心激酶又可分為P21激活激酶Ⅰ–Ⅱ和生發(fā)中心激酶Ⅰ–Ⅷ。作為重要的多功能蛋白,Ste20相似激酶在增殖,分化,凋亡,細(xì)胞生長(zhǎng),細(xì)胞周期調(diào)控,細(xì)胞遷移等過(guò)程中發(fā)揮重要作用。渦蟲(chóng)具有匪夷所思的形態(tài)可塑性和再生能力,且隨著原位雜交,基因沉默,表達(dá)序列標(biāo)簽的收集,基因芯片等分子技術(shù)在渦蟲(chóng)上的實(shí)現(xiàn),渦蟲(chóng)已成為在穩(wěn)態(tài)和

2、再生過(guò)程中研究細(xì)胞功能的重要模式生物。
　　我們?cè)跂|亞三角渦蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)Ste20相似激酶類(lèi)似基因,并將其命名為DjSLK。DjSLK基因全長(zhǎng)為1066 bp,含有879 bp的最大開(kāi)放閱讀框,編碼292個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì),相對(duì)分子量約為32.4 kDa。在NCBI上進(jìn)行BLASTP發(fā)現(xiàn),該基因含有Pkinasec_like結(jié)構(gòu)域,深入的氨基酸序列比對(duì)表明,DjSLK與其它動(dòng)物Ste20相似激酶的相似性為61.1％~72.2%

3、。進(jìn)化分析顯示,DjSLK與C.sinensis及S.japonicum SLK聚群,并處于進(jìn)化樹(shù)的底部,表明DjSLK為Ste20相似酶的原始類(lèi)型。整體原位雜交結(jié)果表明,DjSLK表達(dá)于渦蟲(chóng)包括腦和腹神經(jīng)索的中樞神經(jīng)系統(tǒng)。再生過(guò)程中,DjSLK的表達(dá)水平與再生時(shí)間呈正相關(guān),并于再生的第七天達(dá)到最大值,第九天時(shí)回復(fù)到原初的表達(dá)水平。干擾DjSLK后,東亞三角渦蟲(chóng)靜止不動(dòng),身體褶皺,膨脹,最終裂解死亡。熒光免疫組化的結(jié)果證明DjSLK與東