東亞三角渦蟲(chóng)cDNA文庫(kù)的構(gòu)建及DjGon基因的進(jìn)化、表達(dá)分析.pdf

1、東亞三角渦蟲(chóng)(Dujesia japonica)是扁形動(dòng)物門(mén)的代表動(dòng)物。在動(dòng)物演化的歷史進(jìn)程中，扁形動(dòng)物是首次出現(xiàn)兩側(cè)對(duì)稱(chēng)、三胚層的類(lèi)群。其所處的特殊演化地位，和強(qiáng)大的再生作用，為我們研究動(dòng)物起源、進(jìn)化、胚胎發(fā)育、染色體、行為以及細(xì)胞分化與脫分化分子機(jī)理提供了優(yōu)良材料。 本文應(yīng)用Clontech公司Creator<'TM> SMART<'TM> cDNA Library Construction Kit，構(gòu)建了東亞三角渦蟲(chóng)cD

2、NA文庫(kù)。對(duì)文庫(kù)克隆進(jìn)行序列測(cè)定和生物信息學(xué)分析，共獲得208個(gè)rRNA基因，148個(gè)編碼蛋白基因，78個(gè)位于染色體上片段基因。編碼蛋白大體分為：38個(gè)和酶類(lèi)有關(guān)蛋白，27個(gè)參與基因調(diào)節(jié)與信號(hào)傳導(dǎo)蛋白，11個(gè)位于線粒體細(xì)胞器中的蛋白，18個(gè)維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)，負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白，7個(gè)與腫瘤相關(guān)蛋白，5個(gè)泛素蛋白家族成員。這些基因在渦蟲(chóng)中多數(shù)均為首次報(bào)道，并且許多具有完整的開(kāi)放性閱讀框(ORF)，甚至有些極有可能是渦蟲(chóng)中的特有基因，對(duì)這些

3、基因的深入研究，可能為將來(lái)揭示渦蟲(chóng)再生作用過(guò)程的分子機(jī)制和發(fā)育進(jìn)化中的特殊地位提供物質(zhì)基礎(chǔ)。 從東亞三角渦蟲(chóng)文庫(kù)中分離的克隆K30，經(jīng)生物信息學(xué)分析表明和人、老鼠、馬、牛等哺乳動(dòng)物同源性高于28％，該蛋白具有ADAMTS家族某些成員的GON保守結(jié)構(gòu)域。利用該基因編碼的296個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白進(jìn)行進(jìn)化分析，表明東亞三角渦蟲(chóng)DjGon基因可能代表了脊椎動(dòng)物ADAMTS-9和-20基因分化前的一種前體基因型。 通過(guò)So