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1、在植物轉(zhuǎn)化系統(tǒng)中應(yīng)用較為廣泛的標記基因包括抗生素抗性基因和除草劑抗性基因兩大類，常用的抗性基因包括nptⅡ、hpt和bar基因等。但是利用這些標記基因的選擇體系都可能存在生物安全性問題，因而培育無標記基因及安全標記基因的轉(zhuǎn)基因植物已成為基因工程的重要目標之一。 甘露糖選擇體系是一種正選擇體系，磷酸甘露糖異構(gòu)酶（PMI）是一種安全的標記基因。為了獲得對腫瘤治療具有積極作用的aFGF的單鏈抗體，本實驗以大腸桿菌manA基因作為選擇標
2、記基因，利用甘露糖為選擇劑來獲得能夠表達aFGF單鏈抗體的轉(zhuǎn)基因番茄。我們首先通過七組對照實驗確定甘露糖作為選擇劑的最佳濃度，然后分別構(gòu)建了植物表達載體pM390—scFv和pM390—E8—scFv（E8啟動子為果實特異性啟動子），構(gòu)建的雙元表達載體帶有一個單鏈抗體基因，載體上的大腸桿菌manA基因可以表達磷酸甘露糖異構(gòu)酶，因而在轉(zhuǎn)化過程中可以使用甘露糖作為選擇劑。通過實驗我們初步建立了PM1/甘露糖正選擇體系，切取7～9d苗齡的番茄
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