巨噬素對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷模型肺泡液體清除率的影響.pdf

1、目的：巨噬素，是一種來源于二十二碳六烯酸，最新鑒別出來的炎癥促消退介質(zhì)，其具有強(qiáng)大的抗炎促消退作用。本文章主要研究巨噬素對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷模型肺泡液體清除率的影響并探討其可能機(jī)制。
　　方法：雄性SD大鼠(250-320 g)麻醉后，器官插管尾靜脈給予LPS14 ml/kg建立急性肺損傷模型，8h后，巨噬素(600ng/kg)、BOC-2(脂氧素受體抑制劑，600 ng/kg)、LY294002（PI3K抑制劑

2、）經(jīng)尾靜脈或肺泡灌注注入大鼠體內(nèi)，氣管導(dǎo)管緩慢泵入5％ Evans Blue-標(biāo)記的白蛋白(5 ml/kg)到左肺，機(jī)械通氣1h后，腹主動脈放血處死動物。回抽左側(cè)肺中的肺泡灌注液，測定AFC;電鏡鏡下觀察肺組織病理學(xué)變化，測定肺組織TNF-α，髓過氧化物酶(MPO)，IL-10，cAMP,cGMP含量;檢測肺組織勻漿鈉通道(ENaC)，Na，K-ATPase蛋白表達(dá)量以及Na，K-ATPase活性;分離培養(yǎng)大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮(ATⅡ)

3、細(xì)胞，細(xì)胞中加入巨噬素(100nm)與LPS(1 ug/ml)，共培養(yǎng)8小時后，激光共聚焦檢測ENaC蛋白和Na，K ATPase蛋白豐度。
　　結(jié)果：在LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷的大鼠模型中，巨噬素顯著增強(qiáng)肺泡液體清除率，減輕肺水腫;另外，巨噬素顯著增強(qiáng)肺組織勻漿中肺泡上皮ENac通道各亞基蛋白以及Na，K-ATPase各亞基蛋白的表達(dá);增強(qiáng)肺組織勻漿中Na，K-ATPase的活性;肺組織勻漿TNF-α，MPO，IL-10含量明顯降

4、低P＜0.01）;巨噬素通過PI3k/Akt信號通路下調(diào)肺組織勻漿中Nedd4-2蛋白的表達(dá)。在肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞中，巨噬素上調(diào)ENaC和Na，K-ATPase各亞基蛋白的表達(dá)豐度。脂氧素A4受體抑制劑和PI3K抑制劑不但阻斷了巨噬素對cAMP/cGMP的抑制作用，而且還抑制了巨噬素對肺泡液體清除的增強(qiáng)作用。
　　結(jié)論：MaR1素通過ALX/PI3K/Nedd4-2信號通路上調(diào)ENaC，Na，K-ATPase促進(jìn)AFC，減輕LPS誘