烏司他丁對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷保護效果.pdf

1、急性肺損傷(ALI)包括急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是由于各種直接或間接損傷導(dǎo)致的肺部炎癥反應(yīng).烏司他丁是一種存在于人尿中的蛋白酶抑制劑,證實通過其抗炎癥作用可以改善膿毒癥休克相關(guān)的器官功能衰竭和保護缺血再灌注導(dǎo)致的肝、腎、肺損傷.我們采用內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷模型研究烏司他丁的保護作用;并通過體外試驗觀察烏司他丁對激活人單核細胞、中性粒細胞產(chǎn)生TNF-α、IL-1 β和其他炎癥介質(zhì)的影響.在體試驗,成年Wistar大鼠隨機分配成下

2、列各組(每組12只):在量效關(guān)系研究中,模型組(model)尾靜脈注射6mg/ml的脂多糖;低劑量組(L-UTI組)在注射脂多糖后立即注射25,000U/kg劑量的烏司他丁;中劑量組(M-UTI組)在注射脂多糖后立即注射50,000U/kg劑量的烏司他丁;高劑量組(H-UTI組)在注射脂多糖后立即注射100,000U/kg劑量的烏司他丁;假損傷組(sham-lesion組)僅注射0.9％生理鹽水代替脂多糖和烏司他丁;在給藥時間對保護效果

3、研究中,附加兩個給藥組:H1-UTI組在注射脂多糖30分鐘前注射100,000U/kg劑量的烏司他丁,H2-UTI組在注射脂多糖后30分鐘注射100,000U/kg烏司他丁,各組動物在注射脂多糖后6小時處死,分別測定肺組織髓過氧化物酶活性、肺濕重一干重比和肺灌洗液蛋白濃度、出血和中性粒細胞彈性蛋白酶活性,以及肺組織病理學(xué)檢查.體外試驗,在不同濃度烏司他丁條件下用脂多糖刺激人單核細胞,用ELISA試劑盒測定TNF-α、IL-1β的產(chǎn)生.在

4、不同濃度烏司他丁存在的條件下,用合成發(fā)色底物S-2484測定N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(fMLP)刺激人中性粒細胞釋放彈性蛋白酶,用化學(xué)發(fā)光分析測定調(diào)理酵母多糖刺激人中性粒細胞產(chǎn)生自由氧基.靜脈注射6mg/kg脂多糖誘導(dǎo)急性肺損傷表現(xiàn)為嚴重的肺水腫伴肺組織大量中性粒細胞聚集,肺灌洗液蛋白濃度、中性粒細胞彈性蛋白酶活性增加.烏司他丁劑量依賴性減少肺損傷,與模型組比較50,000U/kg烏司他丁顯著抑制肺組織髓過氧化物酶活性、肺濕重