應用基于1H NMR的代謝組學方法研究糖尿病合并抑郁癥大鼠的腦代謝機制.pdf

1、目的:
　　應用基于1HNMR的代謝組學方法對糖尿病合并抑郁癥大鼠前額葉、海馬及下丘腦組織代謝物含量進行檢測，并結合病理學實驗結果綜合探討糖尿病合并抑郁癥的發(fā)病機制，尋找與其發(fā)生發(fā)展相關的生物標志物與代謝調控網絡。
　　材料與方法:
　　將26只Wistar大鼠隨機分成2組，糖尿病合并抑郁癥組(DD)及正常對照組(CON)。DD組采用一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)64mg/kg誘導糖尿病形成，Con組大鼠則予等量檸

2、檬酸緩沖液。在此基礎上，DD組采用28天慢性不可預見性輕度應激(CUMS)方法制備糖尿病合并抑郁癥大鼠模型。此后，利用Open-field及Morris水迷宮實驗對大鼠行為學變化進行分析。取材后，一部分組織用于免疫組化染色，測定兩組大鼠前額葉、海馬及下丘腦的星形膠質細胞內膠質原纖維酸性蛋白（GFAP），谷氨酸脫羧酶(GAD)，谷氨酰胺酶(GLS)及谷氨酰胺合成酶(GS)的表達，其余用于高分辨磁共振波譜研究代謝物變化。
　　結果:<

3、br>　　1.大鼠生物學特性
　　與CON組相比，DD組大鼠血糖明顯升高（＞33.3mol/L），28天慢性應激處理后DD組大鼠體重明顯下降(P＜0.01)，并出現(xiàn)進食及飲水量增加，明顯消瘦，毛色晦暗，二便增多，精神萎靡，反應遲鈍。
　　2.行為學實驗結果
　　28天CUMS處理后，Open-field實驗中DD組大鼠總路程、活動時間及活動次數均減少(P＜0.05)，在Morris水迷宮空間探索實驗中，DD組大鼠站臺穿

4、越次數明顯減少(P＜0.05)。此兩項結果表明DD組大鼠已經表現(xiàn)出明顯的認知及記憶功能障礙。
　　3.免疫組化染色結果
　　DD組大鼠前額葉、海馬及下丘腦星形膠質細胞內膠質原纖維酸性蛋白表達增多，谷氨酰胺合成酶表達降低，谷氨酰胺酶表達增加，前額葉谷氨酸脫羧酶表達增加（以上P＜0.05），共同提示了谷氨酸-谷氨酰胺-γ氨基丁酸循環(huán)失衡。
　　4.兩組大鼠各腦區(qū)代謝物變化
　　與CON組相比，DD組大鼠前額葉中谷氨酸

5、(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、N-乙酰天門冬氨酸(NAA)、肌酸(Cre)、膽堿化合物(Cho)、天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)下降，乳酸(Lac)、牛磺酸(Tau)升高;海馬丙氨酸(Ala)、Glu、Gln、NAA、Cre、Cho下降，Lac、Tau、肌醇(m-Ins)升高;下丘腦γ氨基丁酸(GABA)、NAA、Ala、Glu、Gln、Cho、Gly、Asp下降，Lac升高（以上P＜0.05）。
　　結論:
　　1