逍遙散治療抑郁癥的臨床觀察及1H-NMR代謝組學(xué)研究.pdf

1、選題依據(jù):抑郁癥是以情緒低落為主要臨床表現(xiàn)的精神疾病,伴隨情緒低落、思維遲緩和軀體不適等癥狀,嚴(yán)重者可能導(dǎo)致自殺,極大地影響了人們的生活質(zhì)量和工作效率。
　　由于抑郁癥的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,誘因較多,且易與他病癥混雜,診斷存在較大困難。目前臨床上對于抑郁癥的診斷主要依靠量表、問卷等結(jié)合臨床體征進(jìn)行,如漢密爾頓抑郁量表(Hamilton depression scale, HAMD)和臨床療效總評量表(Clinical Global Im

2、pression, CGI)等,診斷中存在主觀性較強(qiáng),缺乏客觀指標(biāo),易造成誤診、漏診等問題。
　　藥理實(shí)驗(yàn)及臨床研究均表明,逍遙散具有確切的抗抑郁作用。相比西藥副作用大、抗抑郁譜窄等問題,逍遙散在中醫(yī)藥整體觀指導(dǎo)下,具有副作用少、多成分、多靶點(diǎn)、整體調(diào)節(jié)作用等優(yōu)勢,是理想的抗抑郁藥物。但是查閱大量文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),逍遙散治療抑郁癥的臨床研究一般療程不確定、用藥劑量及處方變化較大,在療效評價上也存在較多問題,如缺乏統(tǒng)一規(guī)范評價標(biāo)準(zhǔn)、療效分析

3、不全面、療效評價方法較單一(如中醫(yī)未用半定量法評估)等。與此同時,逍遙散抗抑郁作用機(jī)理并不十分清楚,臨床研究較少,也缺乏能夠反映該方整體作用特點(diǎn)的藥效學(xué)客觀評價體系。
　　代謝組學(xué)的發(fā)展為上述問題的解決提供了新思路,代謝組學(xué)采取“自上而下”的研究方法,可以動態(tài)連續(xù)的分析代謝物的改變而產(chǎn)生的信息。通過發(fā)現(xiàn)與疾病診斷以及與治療相關(guān)的代謝標(biāo)記物,用于臨床疾病的診斷及藥物療效評價。這種整體性、系統(tǒng)性分析方式與中醫(yī)整體觀思想相一致。

4、　　目的:1.本研究依據(jù)前期實(shí)驗(yàn)室大量藥理實(shí)驗(yàn)篩出的逍遙散抗抑郁最佳劑量,從中西醫(yī)兩個角度對逍遙散治療抑郁癥的療效進(jìn)行臨床觀察;2.本研究以抑郁癥患者為研究對象,采集血液和尿液,使用基于核磁代謝組學(xué)方法尋找抑郁癥特征生物標(biāo)志物;3.采用代謝組學(xué)方法對逍遙散治療抑郁癥進(jìn)行療效評價及作用機(jī)制分析。
　　方法:1.分別設(shè)立抑郁癥藥物治療組、健康人對照組兩個大組,其中抑郁癥逍遙散治療組60例,健康人對照組60例。對治療組受試者采用交談與觀

5、察相結(jié)合方式,在給藥前及治療后2、4、6、8周(wk)末進(jìn)行HAMD、中醫(yī)證候量表、CGI兩項(病情嚴(yán)重程度-SI、療效總評-GI)的評分。采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。
　　2.逍遙散治療組分別在治療前及治療結(jié)束后,采集血液樣本進(jìn)行代謝組學(xué)分析,同時采集健康對照組血液進(jìn)行代謝組學(xué)對照分析。同時入組抑郁癥患者還在服藥前及治療后2、4、6、8周末采集尿液進(jìn)行代謝組學(xué)分析,觀察不同時間點(diǎn)代謝標(biāo)志物的動態(tài)變化。同時為觀察抑郁癥患

6、者服用西藥的所引起的代謝變化,還收集了17名半年內(nèi)只接受過帕羅西汀藥物治療的抑郁癥患者的血液和尿液進(jìn)行代謝組學(xué)分析。
　　3.對上述生物樣本進(jìn)行NMR測試,采用MestRenova圖譜處理軟件對NMR數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理和積分,對積分后的數(shù)據(jù)用SIMCA-P13.0進(jìn)行主成分分析( Principal component analysis, PCA)、偏最小二乘判別分析(Partial least squares-discriminat

7、ion analysis, PLS-DA)和正交-偏最小二乘判別分析(Orthogonal signal correction filtered partial least squares discrimination analysis, OPLS-DA)。經(jīng)過分析得到相應(yīng)的散點(diǎn)圖和載荷圖,散點(diǎn)圖對不同組別分類情況進(jìn)行比較;載荷圖用來尋找引起組間差異的代謝標(biāo)志物;通過代謝組學(xué)技術(shù)對逍遙散治療抑郁癥進(jìn)行療效評價并初步闡述抑郁癥的發(fā)病機(jī)制。

8、
　　結(jié)果:本研究共納入抑郁癥患者62例,試驗(yàn)過程中脫落4例,實(shí)際完成觀察病例58例。
　　1.臨床療效分析:以 HAMD減分率評定療效,58例患者經(jīng)過8周治療,痊愈38例、顯著進(jìn)步14例、進(jìn)步4例、無效2例、顯效率為90％。治療后第2、4、6、8wk末HAMD、CGI-SI及中醫(yī)證候量表評分與基線相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　2.血漿NMR代謝組學(xué)結(jié)果分析:通過PLS-DA分析,抑郁癥患者組同健康對照

9、組能夠很好的分開。結(jié)合VIP pot和loading plot并對差異變量進(jìn)行t檢驗(yàn)可以鑒定出12個差異代謝標(biāo)志物。與健康對照組相比,抑郁癥患者血漿中的(亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、丙氨酸、谷氨酸、β-羥基丁酸、丙酮酸、檸檬酸、肌酐、氧化三甲胺)水平降低,而乳酸和N-乙酰糖蛋白水平升高。代謝物的變化同時引起了相關(guān)生化途徑如氨基酸代謝、能量代謝、酮體和其他代謝途徑的變化。通過多元統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)逍遙散治療8周后與治療前能夠明顯分開,且12個差異

10、代謝標(biāo)志物中11個標(biāo)志物發(fā)生了明顯的回調(diào)。逍遙散通過調(diào)整氨基酸代謝,能量代謝,酮體和其他代謝途徑發(fā)揮了很好地抗抑郁作用。
　　3.尿液NMR代謝組學(xué)結(jié)果分析:通過PCA、PLS-DA、OPLS-DA等多元統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),2周治療后抑郁癥患者組同健康對照組分離度較小,說明逍遙散此時對患者代謝物的調(diào)節(jié)還不明顯,還需繼續(xù)進(jìn)行服藥治療。4、6、8周治療后抑郁癥組均能同治療前明顯分離,說明從第4周起逍遙散治療對代謝物起到了很好地調(diào)節(jié)作用。8種

11、代謝物被確定為逍遙散治療抑郁癥的潛在生物標(biāo)志物。肌酐、黃尿酸、牛磺酸、α-酮戊二酸8周治療后顯著增加;乳酸、丙氨酸、檸檬酸和二甲胺是8周治療后顯著減少。乳酸、肌酐、黃尿酸、檸檬酸、丙氨酸和二甲胺經(jīng)過4周、6周的治療后與8周治療后有相同的變化趨勢(P<0.05)。2周治療后只有肌酐水平顯著增加(P<0.05),二甲胺、乳酸水平顯著降低(P<0.05)。結(jié)合文獻(xiàn)報道,在逍遙散干預(yù)下,這些標(biāo)志物含量發(fā)生了明顯回調(diào),表明逍遙散可能是基于對能量代

12、謝,腸道微生物,色氨酸代謝和?；撬岽x等相關(guān)代謝途徑的調(diào)節(jié)起到了很好地抗抑郁作用。
　　結(jié)論:1.采用HAMD、CGI-SI與中醫(yī)證候量表相結(jié)合手段,從中西醫(yī)兩個角度分析,逍遙散對于輕中度抑郁癥患者治療效果更好。
　　2.本研究采用核磁代謝組學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)了抑郁癥患者血漿中12個潛在生物標(biāo)志物,并有望用于抑郁癥臨床診斷。
　　3.將傳統(tǒng)抑郁癥臨床診斷評價手段(HAMD、CGI-SI)與代謝組學(xué)技術(shù)相結(jié)合,共同評價逍遙散的抗