馬、驢和騾成纖維細(xì)胞培養(yǎng)、核型及其G帶分析研究.pdf

1、分類號(hào)UDC學(xué)校代碼!Q12魚論文題目密級(jí)編號(hào)學(xué)號(hào)—3080—8023研究生：韭篚直指導(dǎo)教師：奎喜塑數(shù)援專業(yè)：動(dòng)物堂研究方向：生墮生物堂區(qū)生物撞苤學(xué)院：生金科堂堂院二零一零年三月內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要本研究以馬、驢、騾為材料，利用體外培養(yǎng)技術(shù)構(gòu)建了馬、驢、騾的成纖維體細(xì)胞系，然后采用常規(guī)染色體標(biāo)本制作技術(shù)，制備、分析并比較了其染色體組型。在此基礎(chǔ)上嘗試了制備馬、驢、騾染色體G帶標(biāo)本制備的最佳條件，并完成馬、驢、騾染色體G帶對(duì)比分析。

2、本研究為馬、驢、騾細(xì)胞遺傳學(xué)研究和疾病診斷提供技術(shù)基礎(chǔ)，同時(shí)為進(jìn)一步闡明馬、驢的親緣關(guān)系及其種間雜交的生殖調(diào)控提供了基礎(chǔ)遺傳學(xué)資料。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：1成纖維體細(xì)胞系的構(gòu)建：實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明常規(guī)的細(xì)胞系構(gòu)建和培養(yǎng)方法宜適用于馬、驢和騾成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)時(shí)所用培養(yǎng)液為DMEM，血清含量為10％，培養(yǎng)溫度為375。C，C02濃度為5％。傳代時(shí)用DPBS沖洗細(xì)胞，用O25％的胰蛋白酶／EDTA消化，傳代比例為1：3，3“4天更換培養(yǎng)液。2染色體標(biāo)本及G

3、帶標(biāo)本制作：通過常規(guī)染色體制備方法，可以制備出較好的馬、驢和騾染色體標(biāo)本。本實(shí)驗(yàn)將馬、驢、騾細(xì)胞在終濃度為O0671ag／ml秋水仙素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)35h，0075mol／LKCl低滲處理32min，固定液以甲醇：冰醋酸以3：1體積比配置，預(yù)固定和固定時(shí)間分別為lmin、30min，固定2次。滴片后用終濃度為0076％的Giemsa染液染色處理10“～15min。本研究制備染色體G帶標(biāo)本時(shí)總結(jié)出兩種較好的方法：標(biāo)本老化法和直接顯帶法。標(biāo)