Gαq在系統(tǒng)性紅斑狼瘡T細胞中的表達及機制研究.pdf

1、目的:
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus，SLE)是一種復雜的自身免疫性疾病，主要由自身抗體抗原形成的免疫復合物沉積導致多系統(tǒng)多器官組織的損傷,T細胞功能缺陷是SLE整個免疫系統(tǒng)紊亂的核心。Gαq為G蛋白的亞家族成員之一的Gq蛋白的α亞基，研究表明Gαq對T、B細胞免疫反應(yīng)具有重要調(diào)節(jié)作用。本課題通過檢測Gαq在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞及T淋巴細胞中的表達水平，并分析Gαq與S

2、LE病情活動指數(shù)（Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index,SLEDAI）、臨床表現(xiàn)、實驗室指標、Th1、Th2、Th17、Treg細胞的細胞因子和Bax、Bcl-2等凋亡相關(guān)基因的相關(guān)性，進一步探討Gαq在SLE發(fā)病機制中的作用。
　　方法:
　　選取我院風濕免疫科就診的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者40例（5男35女，平均年齡32.6±9.4歲），所有患者均符合1997年

3、美國風濕病學會系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷標準，并排除合并有癌癥、嚴重感染、肝炎、結(jié)核和過敏者。選取37例（3男34女，平均年齡33.5±9.5歲）正常健康體檢者作為對照，兩組入選者的性別、年齡和種族無統(tǒng)計學差異。部分患者及健康者自愿多獻出血量用于CD3+T細胞的磁珠分選，由34例(3男31女，平均年齡29.5±6.6歲)患者及30例（7男23女，平均年齡28.3±6.3歲）正常對照者組成CD3+T細胞組。采用Real-time PCR方法檢測各

4、組的Gαq mRNA表達水平。
　　分析患者Gαq mRNA表達水平與常見臨床特征，如脫發(fā)、口腔潰瘍、皮疹、漿膜炎、貧血、白細胞減少、血小板減少、腎臟受累、關(guān)節(jié)炎，實驗室檢查如ANA、抗ds-DNA、抗AnuA、抗smith、抗rRNP、抗AHA抗體、補體C3、補體C4、IgG、肌酐和尿蛋白的相關(guān)性。
　　Real-time PCR檢測SLE T細胞中IL-4、IFN-r、IL-17、Foxp3mRNA表達水平與正常對照的差

5、異，并分別進行與Gαq mRNA的相關(guān)性分析。
　　Real-time PCR檢測患者T淋巴細胞中Bax、Bcl-2 mRNA的表達水平進一步分析其與Gαq mRNA的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　?、賁LE患者PBMC和CD3+T淋巴細胞中GαqmRNA表達水平明顯低于HC，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.0001;p=0.025)，提示Gαq可能參與SLE的發(fā)病。但只有SLE患者CD3+T細胞中GαqmRNA的表達水平與SLE

6、DAI具有統(tǒng)計學差異(r=-0.561，p=0.001);而SLE患者PBMCs中的GαqmRNA的表達水平與SLEDAI無相關(guān)性(r=-0.059，p=0.716)，提示T細胞中Gαq與SLE病情活動相關(guān)。
　?、贑D3+T細胞的GαqmRNA水平在有腎臟受累的患者中明顯低于腎臟無損傷的患者和正常對照(p=0.0023，p=0.0006)，GαqmRNA水平在有脫發(fā)、口腔潰瘍、皮疹、漿膜炎、貧血、白細胞減少、血小板減少、關(guān)節(jié)炎者

7、和沒有上述相關(guān)臨床表現(xiàn)的患者相比無差異。
　　進一步結(jié)果揭示SLE患者CD3+T細胞中GαqmRNA水平與肌酐和尿蛋白負相關(guān)(r=-0.507，p=0.002;r=-0.429，p=0.011)與補體C3正相關(guān)(r=0.390，p=0.022)與補體C4、ANA、抗ds-DNA、抗smith、抗rRNP、抗AnuA、抗AHA抗體、IgG等無相關(guān)。
　?、跧FN-r、IL-17、Foxp3mRNA等在SLE T細胞中的表達都高

8、于HC(p=0.033;p=0.012; p=0.001)，但是IL-4mRNA的表達水平與對照相比無統(tǒng)計意義(p=0.256)。
　　SLE患者PBMC中的IL-4、IFN-r、IL-17、Foxp3mRNA水平與GαqmRNA表達水平都無相關(guān)性:(r=-0.017，p=0.914; r=0.247，p=0.123; r=-0.052，p=0.748; r=0.148，p=0.356);但是在患者CD3+T細胞中GαqmRNA的

9、表達水平分別與IL-4、IFN-r、IL-17mRNA水平呈負相關(guān)(r=-0.457，p=0.006; r=-0.456，p=0.005; r=-0.614，p＜0.0001)但是GαqmRNA表達水平與Foxp3mRNA水平無相關(guān)（r=-0.113，p=0.525）。
　?、躍LE患者CD3+T細胞中的GαqmRNA表達水平分別與促凋亡基因Bax正相關(guān)(r=0.542，p=0.001)與抗凋亡基因Bcl-2負相關(guān)(r=-0.36