系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中microRNAs的表達情況研究.pdf

1、目的：系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）是自身免疫介導(dǎo)的，以免疫性炎癥為突出表現(xiàn)的彌漫性結(jié)締組織病，其發(fā)病機制尚不完全清楚。microRNA是一類分布廣泛的小的非編碼蛋白質(zhì)的RNAs，在生物體內(nèi)負調(diào)控基因表達。本研究旨在利用生物信息學(xué)方法和分子生物學(xué)方法，尋找出與SLE發(fā)病可能相關(guān)的microRNA，并初步探討其在疾病中的作用。方法：通過在SLE發(fā)病中起到明確作用的編碼區(qū)基因，借助于哺乳動

2、物microRNA靶基因數(shù)據(jù)庫miRanda和TargetScan，利用生物信息學(xué)分析方法查找出與SLE發(fā)病機制可能相關(guān)的microRNA。應(yīng)用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Real-timePCR）技術(shù)驗證has-miR-146a、has-miR-181d、has-miR-7在SLE患者及正常人外周血單個核細胞中的表達差異，同時對has-miR-146a、has-miR-181d、has-miR-7在基因組中的位置及其可能作用的與SLE發(fā)

3、病相關(guān)的靶基因進行了確定和預(yù)測，為其在疾病中的作用及其靶基因測定和參與發(fā)病的機制提供了一定的線索。結(jié)果：RT-PCR結(jié)果顯示SLE患者外周血PBMCs中hsa-miR-146a的△Ct高于正常對照組（4.52±1.18 vs.2.76±1.38），mRNA的表達量顯著低于正常對照組，且兩者之間有顯著性統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.02）；hsa-miR-181d的△Ct高于正常對照組（6.39±0.31 vs.5.75±0.88）相比，兩者之間并