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文檔簡介
1、目的:開發(fā)制備GCET2兔單克隆抗體,研究其在彌漫大B細胞淋巴瘤(diffuse largeB cell lymphoma,DLBCL)診斷中的應用。
方法:用人GCET2蛋白片段免疫兔子,取血清效價最高兔子的脾細胞與兔骨髓瘤細胞240E-W3融合,采用兔單克隆抗體技術(shù)制備GCET2兔單克隆抗體;經(jīng)免疫印跡(WB)、免疫組化(IHC)和免疫細胞化學(ICC),流式細胞術(shù)等方法鑒定其特異性;采用IHC法,檢測GCET2與其他DL
2、BCL診斷相關(guān)標記(CD10、Bcl6、MUM1、GCET1、FOXP1、Ki67和c-myc)在81例DLBCL、5例濾泡細胞淋巴瘤(follicular lymphoma,F(xiàn)L)和2例Burkitt's淋巴瘤臨床樣本組織中的表達,并將GCET2增補進Hans分類法和Choi分類法,比較在生發(fā)中心來源的DLBCL(Germinal center B-cell like DLBCL,GCB-DLBCL)診斷中的差異。
結(jié)果:經(jīng)
3、ELISA、WB、IHC、ICC及流式細胞術(shù)鑒定,GCET2(EP316)抗體能特異性識別生發(fā)中心B細胞及其來源的腫瘤組織和細胞系(Raji,Daudi和Ramos)中的GCET2蛋白;以Hans分類法和Choi分類法對81例DLBCL進行分類,GCB-DLBCL所占比例分別為21%(17/81)和23%(19/81),增補GCET2后GCB-DLBCL診斷比例分別提高至54%(44/81)和52%(42/81)。此外,c-myc高表達
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