去腎交感神經(jīng)對(duì)青年自發(fā)性高血壓大鼠血壓及靶器官的影響.pdf

1、目的：高血壓作為一種全球流行性疾病,已有相關(guān)研究表明交感神經(jīng)和腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）的激活在高血壓的發(fā)生和發(fā)展中起著極其重要的作用。應(yīng)用藥物可抑制交感神經(jīng)和RAAS系統(tǒng)的過(guò)度激活以起到降壓的作用，但需要長(zhǎng)期服用，并存在藥物副反應(yīng)。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外的研究表明，采用經(jīng)皮導(dǎo)管去腎交感神經(jīng)射頻消融術(shù)（RFA）可有效的抑制交感神經(jīng)和RAAS系統(tǒng)的過(guò)度激活使血壓下降，達(dá)到治療頑固性高血壓的目的，進(jìn)而使靶器官獲益。由于這是一項(xiàng)治療頑固

2、性高血壓的新技術(shù)，是在傳統(tǒng)方法上的突破和創(chuàng)新，需要大量的基礎(chǔ)以及臨床研究來(lái)證明其安全有效性。已有研究顯示該項(xiàng)技術(shù)可以使得自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）的血壓下降將近40mmHg。本研究旨在觀察SHR去腎交感神經(jīng)手術(shù)前后血壓的變化以及對(duì)靶器官的影響，探討去腎交感神經(jīng)術(shù)對(duì) SHR血壓的干預(yù)效果及相關(guān)靶器官的影響，進(jìn)而為治療原發(fā)性高血壓提供新的治療方法。
　　方法：將12周齡的青年SHR（n=24）作為研究對(duì)象，聯(lián)合應(yīng)用外科手術(shù)切除及化學(xué)消

3、融方法（10％的苯酚酒精溶液）建立去腎交感神經(jīng)模型。將其隨機(jī)分為去腎交感神經(jīng)術(shù)組（RDN組）和假手術(shù)組（Sham組）。相同周齡的WKY大鼠（n=12）為基線(xiàn)對(duì)照組。術(shù)前及術(shù)后每周測(cè)量一次血壓及體重至處死前一天。并分別于術(shù)后1w、8w、12w隨機(jī)處死各組大鼠各4只，分別留取血漿、心臟、腎臟、主動(dòng)脈。用ELISA法測(cè)定血漿中去甲腎上腺素（NE）及血管緊張素II（Ang II）的含量。計(jì)算左室質(zhì)量指數(shù)（LVMI）；心肌組織進(jìn)行HE染色觀察左心

4、室心肌細(xì)胞形態(tài)；Western Blot法分別檢測(cè)左心室α-MHC和COL I的蛋白表達(dá)。腎臟組織進(jìn)行HE染色觀察腎臟形態(tài)，進(jìn)行PAS染色觀察腎小球硬化程度；Western Blot法檢測(cè)腎臟COL I的蛋白表達(dá)。主動(dòng)脈進(jìn)行 HE染色觀察主動(dòng)脈形態(tài)，應(yīng)用Image-Pro Plus6.0測(cè)量血管內(nèi)徑（Luminal radius,LR）、血管中膜厚度（Media thickness,MT），計(jì)算血管中膜厚度/血管內(nèi)徑（MT/LR）。采用

5、SPSS13.0版軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，定量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（?x±s）表示，兩組均數(shù)間的比較采用t檢驗(yàn)，多組均數(shù)間的比較采用單因素方差分析（one way ANOVA），多個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行的重復(fù)測(cè)量采用重復(fù)測(cè)量方差分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.體重的比較
　　RDN組與Sham組在手術(shù)前及術(shù)后每周的體重比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。但RDN組與Sham組在手術(shù)前及術(shù)后每周的體重均低于W

6、KY組（P<0.05）。
　　2.各組收縮壓的測(cè)量
　　術(shù)前RDN組與Sham組的SBP無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（175.0±2.8mmHg vs.174.5±2.7mmHg）（P>0.05），且均大于WKY組的SBP（132.2±4.2mmHg）（P<0.05）。與Sham組相比，RDN組的SBP在術(shù)后1w、2w、3w、4w、5w均低于Sham組（145.3±1.6mmHg vs.181.0±3.7mmHg,154.8±2.9mmHg

7、 vs.190.4±7.7mmHg,160.3±4.5mmHg vs.196.0±6.4mmHg,166.2±4.3mmHg vs.203.6±8.0mmHg,184.6±3.2mmHg vs.201.5±9.0mmHg）（P<0.05），術(shù)后6w及以后各時(shí)間點(diǎn)兩組SBP均無(wú)明顯差異（P>0.05）。與WKY組相比，RDN組和Sham組各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的SBP均高于WKY組（P<0.05）。Sham組的SBP術(shù)后1w較術(shù)前稍升高（181.0

8、±3.7mmHg vs.174.5±2.7mmHg）(P<0.05)，術(shù)后2w（190.4±7.7mmHg）與術(shù)后1w無(wú)明顯變化(P>0.05)，術(shù)后3w（196.0±6.4mmHg）較術(shù)后2w稍升高（P<0.05），術(shù)后3w以后SBP一直維持在較高水平且無(wú)明顯變化（P>0.05）。WKY組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的SBP均無(wú)明顯變化（P>0.05）。
　　3.血漿NE含量的變化
　　術(shù)后1w RDN組血漿中NE含量與WKY組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)

9、差異（169.1±3.8pg/ml vs.170.4±3.2pg/ml）（P>0.05），且二者均顯著低于Sham組（222.3±4.2pg/ml）（P<0.05）。術(shù)后8w RDN組血漿中NE含量與Sham組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（231.4±3.8pg/ml vs.234.5±2.7pg/ml）（P>0.05），且均高于WKY組（171.3±5.6pg/ml）（P<0.05）。術(shù)后12w RDN組血漿中NE含量與Sham組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

10、（238.6±2.7pg/ml vs.241.1±5.9pg/ml）（P>0.05），且均高于WKY組（171.4±5.4pg/ml）（P<0.05）。
　　4.血漿中Ang II含量的變化
　　術(shù)后1w RDN組血漿中Ang II含量與WKY組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（90.0±1.4pg/ml vs.89.3±2.4pg/ml）（P>0.05），且二者均顯著低于Sham組（171.9±2.8pg/ml）（P<0.05）。術(shù)后8w

11、 RDN組血漿中Ang II含量與Sham組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（174.5±2.0pg/ml vs.173.9±1.5pg/ml）（P>0.05），且均高于WKY組（90.1±3.2pg/ml）（P<0.05）。術(shù)后12w RDN組血漿中Ang II含量與Sham組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（173.5±1.9pg/ml vs.173.3±2.8pg/ml）（P>0.05），且均高于WKY組（90.1±2.9pg/ml）（P<0.05）。
　

12、　5.LVMI的變化
　　RDN組與Sham組相比術(shù)后1w、8w、12w的LVMI均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差（P>0.05），但上述兩組LVMI在各自時(shí)間點(diǎn)均顯著高于相應(yīng)WKY組（P<0.05）。
　　6.心肌HE染色觀察三組大鼠心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化
　　WKY組術(shù)后1w、8w、12w的心肌細(xì)胞大小均正常，排列整齊，心肌細(xì)胞核呈橢圓形，居于細(xì)胞中央，心肌間質(zhì)無(wú)明顯增生表現(xiàn)。RDN組與Sham組術(shù)后1w、8w、12w的心肌細(xì)胞均出現(xiàn)不同

13、程度的損傷，表現(xiàn)為心肌細(xì)胞肥大且排列較紊亂，心肌間質(zhì)明顯水腫，部分心肌細(xì)胞溶解，周?chē)Y(jié)構(gòu)不清。
　　7.Western Blot法檢測(cè)大鼠心臟α-MHC以及COL I的蛋白表達(dá)含量與Sham組相比，RDN組術(shù)后1w、8w、12wα-MHC的蛋白表達(dá)含
　　量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），且均低于相同時(shí)間點(diǎn)WKY組的蛋白表達(dá)含量（P<0.05）。與Sham組相比，RDN組術(shù)后1w、8w、12w COL I的蛋白表達(dá)含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)

14、差異（P>0.05），且均高于相同時(shí)間點(diǎn)WKY組的蛋白表達(dá)含量（P<0.05）。
　　8.腎臟HE染色及PAS染色觀察三組大鼠腎臟形態(tài)學(xué)變化及腎小球硬化
　　WKY組術(shù)后1w、8w、12w的腎小球大小及形態(tài)均正常，腎小管排列規(guī)則。RDN組與Sham組術(shù)后1w、8w、12w的個(gè)別腎小球皺縮甚至硬化，部分腎小球可見(jiàn)代償性肥大，部分腎小管萎縮。
　　9.Western Blot法檢測(cè)腎臟COL I的蛋白表達(dá)含量
　　與

15、Sham組相比，RDN組術(shù)后1w、8w、12w COL I的蛋白表達(dá)含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），且均高于相同時(shí)間點(diǎn)的 WKY組的蛋白表達(dá)含量（P<0.05）。
　　10.主動(dòng)脈 HE染色觀察三組大鼠主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化及相關(guān)指標(biāo)的測(cè)量
　　WKY組的主動(dòng)脈血管內(nèi)徑（LR）、中膜厚度（MT）及MT/LR在術(shù)后1w、8w、12w無(wú)明顯變化（P>0.05），且內(nèi)徑及中膜厚度均正常，血管壁細(xì)胞排列規(guī)則。Sham組的主動(dòng)脈血管內(nèi)徑（

16、LR）、中膜厚度（MT）及MT/LR在術(shù)后1w、8w、12w逐漸增大（P<0.05），且血管壁細(xì)胞排列不規(guī)則，細(xì)胞密度減低。RDN組的主動(dòng)脈血管內(nèi)徑（LR）、中膜厚度（MT）及MT/LR在術(shù)后1w、8w、12w逐漸增大（P<0.05），且與相同時(shí)間點(diǎn)的Sham組無(wú)明顯差別（P>0.05），均大于相同時(shí)間點(diǎn)的WKY組（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.去腎交感神經(jīng)術(shù)對(duì)大鼠的生長(zhǎng)無(wú)影響，但長(zhǎng)期高血壓則阻礙大鼠的生長(zhǎng)。