Pokemon、MDM2和p53蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:中國是世界上食管癌高發(fā)病率及死亡率的國家。多年來,食管癌的發(fā)病率和死亡率居高不下,嚴(yán)重威脅國民的生命健康。與歐美國家不同,中國居民的食管癌病理組織學(xué)類型主要為鱗狀細(xì)胞癌,占90%以上。目前公認(rèn),早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷和早期治療即“三早”是食管癌防治的最有效措施,而早期發(fā)現(xiàn)和早期診斷是實(shí)現(xiàn)早期治療的關(guān)鍵。目前臨床上常用的單一腫瘤標(biāo)志物對于食管癌的早診價(jià)值有限,更多的研究聚焦于多腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測提高早期診斷率。因此,本研究將食管鱗癌作為

2、研究對象,選取 Pokemon→ARF→MDM2→wtp53(野生型 p53)致癌通路中的Pokemon、MDM2和p53(包括野生型 p53、突變型 p53)蛋白為研究指標(biāo),采用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶連接(SP)法檢測食管鱗癌組織與癌旁正常食管組織中Pokemon、MDM2和p53蛋白的表達(dá)情況,分析三者與臨床病理特征之間的關(guān)系,探討其臨床意義。
  方法:
  1、食管鱗癌組織和正常對照組織來源于201

3、0年1月至2014年12月期間,在河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院行手術(shù)治療的62例食管鱗癌患者,術(shù)前均未進(jìn)行化療、放療和其他與抗腫瘤相關(guān)的治療。其中男性39例,女性23例;年齡48歲~75歲,平均年齡63.13±5.67歲。全部研究對象均經(jīng)我院病理科兩位高年資醫(yī)師獨(dú)立做出診斷,診斷一致者納入研究范圍。分組情況:食管鱗癌組62例(手術(shù)切除的腫瘤組織);對照組標(biāo)本選取上述患者的癌旁正常食管黏膜組織35例(距離食管癌組織邊緣5厘米以上)。高分化鱗癌10

4、例,中分化鱗癌28例,低分化鱗癌24例。侵及纖維膜36例,未侵及纖維膜26例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移24例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移38例。臨床TNM分期I+II期42例,III+IV期20例。
  2、常規(guī)組織學(xué)處理所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林溶液固定,常規(guī)石蠟包埋切片,HE染色供病理學(xué)觀察。腫瘤組織學(xué)分級根據(jù)美國聯(lián)合癌癥委員會(AJCC)/國際抗癌聯(lián)盟(UICC)2009年制訂的第七版食管鱗狀細(xì)胞癌TNM分期系統(tǒng)。
  3、免疫組織化學(xué)檢測

5、石蠟包埋組織以厚度4um連續(xù)切片,烤箱過夜(60℃~65℃),常規(guī)脫蠟,應(yīng)用檸檬酸修復(fù)液煮沸修復(fù),采用免疫組化法(SP)染色,嚴(yán)格按照免疫組化試劑盒說明書步驟進(jìn)行, DAB顯色、蘇木素復(fù)染,已知Pokemon蛋白、MDM2蛋白、p53蛋白陽性切片作陽性對照,陰性對照以PBS液代替一抗。
  4、結(jié)果判定采用雙盲法顯微鏡下觀察結(jié)果。Pokemon蛋白、MDM2蛋白、p53蛋白為細(xì)胞核染色。陽性判定以染色強(qiáng)度結(jié)合陽性細(xì)胞數(shù)綜合判定。<

6、br>  5、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS16.0軟件,計(jì)數(shù)資料組間比較采用?2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;相關(guān)性檢測使用Spearman等級相關(guān)分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)果:
  1、 Pokemon蛋白組間表達(dá)及與臨床病理特征間關(guān)系
  1.1、 Pokemon蛋白組間比較情況:Pokemon蛋白在食管鱗癌組中及癌旁正常對照組中的陽性表達(dá)率分別為67.74%(42/62)、42.86%(15/35),食管鱗癌

7、組中陽性表達(dá)率顯著高于癌旁正常對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。
  1.2、食管鱗癌中Pokemon蛋白的表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系:食管鱗癌組中Pokemon蛋白的表達(dá)與食管鱗癌分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期明顯相關(guān)(P<0.05),其陽性表達(dá)在低分化鱗癌顯著高于高中分化鱗癌,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,臨床 III+IV期患者明顯高于 I+II期患者;與患者性別、年齡及是否侵及纖維膜無明顯相關(guān)性(

8、P>0.05)。
  2 MDM2蛋白組間表達(dá)及與臨床病理特征間關(guān)系
  2.1、 MDM2蛋白組間比較情況:MDM2蛋白在食管鱗癌組中及癌旁正常對照組中的陽性表達(dá)率分別為54.84%(34/62)、28.57%(10/35),食管鱗癌組中陽性表達(dá)率顯著高于癌旁正常對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。
  2.2、食管鱗癌中MDM2蛋白的表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系:食管鱗癌組中MDM2蛋白的表達(dá)與食管鱗癌分化

9、程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期明顯相關(guān)(P<0.05),其陽性表達(dá)在低分化鱗癌顯著高于高中分化鱗癌,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,臨床 III+IV期患者明顯高于 I+II期患者;與患者性別、年齡及是否侵及纖維膜無明顯相關(guān)性(P>0.05)。
  3、 p53蛋白組間表達(dá)及與臨床病理特征間關(guān)系
  3.1、 p53蛋白組間比較情況:p53蛋白在食管鱗癌組中及癌旁正常對照組中的陽性表達(dá)率分別為72.58%(45/62

10、)、17.14%(6/35),食管鱗癌組中陽性表達(dá)率顯著高于癌旁正常對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。3.2食管鱗癌中p53蛋白的表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系:食管鱗癌組中p53蛋白的表達(dá)與食管鱗癌分化程度、是否侵及纖維膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期明顯相關(guān)(P<0.05),其陽性表達(dá)在低分化鱗癌顯著高于高中分化鱗癌,侵及纖維膜者明顯高于纖維膜未受侵者,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,臨床 III+IV期患者明顯高于 I

11、+II期患者;與患者性別、年齡無明顯相關(guān)性(P>0.05)。
  4、 Pokemon、MDM2和p53蛋白的相關(guān)性
  Spearman等級相關(guān)分析顯示,食管鱗癌組中Pokemon與MDM2蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.599, P<0.01);Pokemon與 p53蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.501, P<0.01);MDM2與p53蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.359, P<0.01)。
  結(jié)論:
  1、 Po

12、kemon、MDM2、mtp53(突變型 p53)蛋白在食管鱗癌中陽性表達(dá)率均顯著高于癌旁正常食管黏膜組,提示Pokemon、MDM2、mtp53蛋白在食管鱗癌發(fā)生過程中發(fā)揮致癌作用,有潛力成為早期診斷食管鱗癌的腫瘤標(biāo)記物。
  2、 Pokemon、MDM2蛋白陽性表達(dá)率與食管鱗癌分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān),mtp53蛋白陽性表達(dá)率與食管鱗癌分化程度、腫瘤是否侵及纖維膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期均相關(guān),提示Pokemon

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