大鼠肺癌發(fā)生過(guò)程中microRNA34a、p53和MDM2表達(dá)及意義.pdf

1、目的：檢測(cè)microRNA34a、p53和MDM2在大鼠肺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的表達(dá)，探討microRNA34a、p53和MDM2與肺癌發(fā)生之間的關(guān)系。
　　 方法：大鼠肺癌模型建立：Wistar大鼠68只，其中60只在左下肺葉支氣管灌注含有MCA和DEN的碘油溶液0.1ml，另8只灌注0.1ml碘油作為對(duì)照。不同時(shí)期進(jìn)行處死大鼠，制作成石蠟包埋組織塊，切片HE染色，鏡檢并進(jìn)行診斷分型，采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR方法進(jìn)行檢測(cè)microR

2、NA34a的表達(dá)情況。用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)p53和MDM2的表達(dá)情況，利用原位雜交的方法檢測(cè)p53和MDM2的mRNA情況，并進(jìn)行分級(jí)，用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0進(jìn)行卡方檢驗(yàn)和相關(guān)性統(tǒng)計(jì)統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果
　　 1.動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)組有48只大鼠發(fā)生癌變，誘癌率為80％(48/60)，癌變的大鼠標(biāo)本有多個(gè)階段病變共存，共獲取支氣管黏膜上皮增生21例，不典型增生13例，原位癌28例，侵襲癌20例，轉(zhuǎn)移癌16例。對(duì)照組未見(jiàn)腫

3、瘤發(fā)生。
　　 2.microRNA34a的表達(dá)采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)microRAN34a，正常組microRNA34a表達(dá)為0.825±0.093；癌旁組織組0.172±0.040；原位癌組織0.037±0..034；浸潤(rùn)癌0.019±0.005；轉(zhuǎn)移癌0.003±0.004。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間存在差異(p<0.01)，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)存在組內(nèi)差異(p<0.01)。
　　 3.p53基因與其蛋白表達(dá)根據(jù)半定量評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

4、p53基因表達(dá)評(píng)分為對(duì)照組1.04±0.49；癌旁組織組1.96±1.01；癌組織組2.61±1.06；浸潤(rùn)癌組3.05±1.24；轉(zhuǎn)移癌組3.83±1.15。組間方差分析F=30.240，p<0.05，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組比較，差異有顯著性(p<0.01)。p53蛋白表達(dá)：對(duì)照組0.79±0.48；癌旁組織組1.92±1.04；癌組織組2.57±1.09；浸潤(rùn)癌組2.98±1.48；轉(zhuǎn)移癌組3.48±1，98，組間方差分析F=21.726，

5、p<0.05，對(duì)照組與原位癌組、癌旁組織組、浸潤(rùn)癌組和轉(zhuǎn)移癌組差異有顯著性(p<0.01)。基因和蛋白的表達(dá)具有一致性(Kappa=0.582，p=0.000)
　　 4.MDM2基因與其蛋白表達(dá)根據(jù)半定量評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)MDM2基因表達(dá)評(píng)分為對(duì)照組1.13±1.10；癌旁組織組1.90±1.03；原位癌組織組3.61±0.73；浸潤(rùn)癌組4.41±1.04；轉(zhuǎn)移癌組5.30±0.54。組間方差分析F＝30.670，p<0.05。MDM2

6、蛋白表達(dá)：對(duì)照組1.10±1.01；癌旁組織組1.96±1.30；癌組織組3.60±0.81；浸潤(rùn)癌組4.08±0.81；轉(zhuǎn)移癌組5.09±0.75，組間方差分析F=26.072，P<0.05?；蚝偷鞍椎谋磉_(dá)具有一致性(Pearson's r=-0.681，p=0.000)。
　　 5.microRNA34a、p53和MDM2之間相關(guān)性在肺鱗癌組織中，microRNA34a和MDM2 mRNA二者呈負(fù)相關(guān)(Pearson's

7、r=-0.681，p=0.000)；microRNA34a和MDM2蛋白二者呈負(fù)相關(guān)(Pearson's r＝-0.671，p=0.000)；microRNA和p53mRNA二者呈負(fù)相關(guān)(Pearson's r=-0.690，p=0.000)；microRNA34a和p53蛋白二者呈負(fù)相關(guān)(Pearson's r=-0.634，p=0.000)；MDM2蛋白和p53蛋白二者呈正相關(guān)(Pearson's r=0.609，p=0.000)；