溫腎健脾化痰方治療肥胖癥的理論及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　通過中醫(yī)藥理論及臨床實(shí)踐研究，探討肥胖癥的中西醫(yī)發(fā)病機(jī)制，為臨床應(yīng)用中醫(yī)理論治療肥胖癥提供理論指導(dǎo)，通過高脂飲食誘導(dǎo)肥胖動(dòng)物模型，探討溫腎健脾化痰方對(duì)肥胖癥大鼠的影響，從分子水平及藥理學(xué)方面研究溫腎健脾化痰對(duì)肥胖癥的作用機(jī)制，從而為溫腎健脾化痰法臨床治療肥胖癥提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　本研究從理論研究和實(shí)驗(yàn)研究兩個(gè)方面進(jìn)行。
　　理論研究:從肥胖癥的診斷、分類和病因病機(jī)以及辨證論治方面進(jìn)行了系統(tǒng)

2、的論述，并從理、法、方、藥四個(gè)方面對(duì)溫腎健脾化痰方治療肥胖癥的機(jī)制進(jìn)行了理論探討。
　　實(shí)驗(yàn)研究:將60只體重100～150g的健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為2組，一組為正常對(duì)照組10只，給予普通飼料喂養(yǎng)，自由取食飲水;其余50只給予高脂飼料喂養(yǎng)，自由取食飲水。每周測量體重、身長2次，喂養(yǎng)4周后選取體質(zhì)量增加大于正常組平均體質(zhì)量15％且Lee's指數(shù)比正常組平均水平增加大于1.5%的大鼠，作為高脂飲食誘導(dǎo)肥胖造模成功大鼠，選取40只造模

3、成功的大鼠隨機(jī)分為4組，分別為模型組、低劑量組、中劑量組和高劑量組，每組10只。正常組和模型組大鼠給予生理鹽水1 ml/100g·d灌胃;低、中、高劑量組大鼠分別給予低、中、高劑量溫腎健脾化痰方1ml/100g·d灌胃。正常組繼續(xù)喂以普通飼料，其他4組繼續(xù)予高脂飼料喂養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)過程中每周測量體重2次，并根據(jù)體重調(diào)整給藥量，連續(xù)治療10周。觀察各組大鼠一般情況和體質(zhì)量的變化，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測各組大鼠血脂及肝功能。運(yùn)用HE染色觀察各組

4、大鼠肝臟組織和脂肪組織的病理形態(tài)學(xué)改變。采用RT-PCR法觀察溫腎健脾化痰方對(duì)肝臟組織SOCS3mRNA表達(dá)的影響，免疫組織化學(xué)法觀察其對(duì)各組大鼠脂肪組織Ghrelin水平的影響。
　　結(jié)果：
　　1)各組大鼠體質(zhì)量的變化:溫腎健脾化痰方低、中、高劑量均能明顯控制肥胖癥大鼠體重的增加，使體重增加的速度明顯變緩，與模型組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，且中劑量組和高劑量組效果明顯優(yōu)于低劑量組并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)

5、，而中、高劑量組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2)各組大鼠肝臟組織及脂肪組織病理學(xué)變化:正常組肝細(xì)胞形態(tài)排列正常，肝小葉規(guī)則，細(xì)胞質(zhì)均勻;模型組均出現(xiàn)程度不等的彌漫性肝細(xì)胞脂肪變性，肝細(xì)胞體積增大，胞漿內(nèi)可見數(shù)量不等、大小不一的圓形脂滴或脂肪空泡，胞核被推向周邊;低劑量組脂變肝細(xì)胞與模型組相當(dāng);中、高劑量組脂變肝細(xì)胞較模型組明顯減少，可見少量脂肪空泡。與正常組大鼠相比，模型組大鼠脂肪細(xì)胞明顯增大，單位視野內(nèi)脂肪細(xì)胞數(shù)明顯減少；低劑量

6、組大鼠脂肪細(xì)胞與模型組相當(dāng);中、高劑量組大鼠脂肪細(xì)胞較模型組明顯減小，單位視野內(nèi)脂肪細(xì)胞數(shù)明顯增多，且中劑量組的變化更為顯著。
　　3)各組大鼠肝功能比較:與正常組相比，模型組與低、中、高劑量組的ALT,AST均顯著升高(P＜0.01,P＜0.05);與模型組相比，溫腎健脾化痰方低、中、高劑量均可顯著降低ALT,AST水平(P＜0.01)，且中、高劑量組效果顯著優(yōu)于低劑量組(P＜0.01)，高劑量組在降低AST水平方面又顯著優(yōu)于中

7、劑量組(P＜0.01)，但在降低ALT水平方面則無明顯區(qū)別(P＞0.05)。
　　4)各組大鼠血脂比較:與正常組相比，模型組與低、中、高劑量組的TC,TG,LDL-C均顯著性升高(P＜0.05)，HDL-C顯著性降低(P＜0.05,提示肥胖癥大鼠模型存在明顯的血脂紊亂。與模型組相比，溫腎健脾化痰方低、中、高劑量組均可顯著性降低TC,TG以及LDL-C(P＜0.01)，升高HDL-C(P＜0.01)，且三組之間比較也有顯著性差異(P

8、＜0.01)。
　　5)各組大鼠肝臟組織SOCS3mRNA表達(dá):模型組大鼠肝臟組織內(nèi)SOCS3mRNA表達(dá)量顯著升高(P＜0.01)，經(jīng)溫腎健脾化痰方治療后，與模型組比較，藥物治療組SOCS3mRNA表達(dá)均顯著下降(P＜0.01)，其中高劑量組與低、中劑量組相比有顯著性差異(P＜0.01)，與正常組相比無明顯區(qū)別(P＞0.05)。
　　6)各組大鼠脂肪組織Ghrelin基因表達(dá):模型組大鼠脂肪組織內(nèi)Ghrelin基因表達(dá)量顯

9、著升高(P＜0.05)，經(jīng)溫腎健脾化痰方治療后，與模型組比較，藥物治療組Ghrelin基因表達(dá)均顯著下降(P＜0.01)，其中高、中劑量組相比無明顯區(qū)別(P＞0.05)，但與低劑量組相比有顯著性差異(P＜0.01)各組大鼠脂肪組織Ghrelin免疫組化檢測結(jié)果:光鏡下脂肪細(xì)胞的細(xì)胞核呈棕黃色或棕褐色的為Ghrelin陽性細(xì)胞，陰性細(xì)胞核為藍(lán)色或藍(lán)紫色。觀察各組大鼠的脂肪細(xì)胞:模型組大鼠脂肪細(xì)胞內(nèi)Ghrelin陽性細(xì)胞明顯較正常組增多，經(jīng)

10、溫腎健脾化痰方藥物治療的大鼠脂肪細(xì)胞內(nèi)Ghrelin陽性細(xì)胞較模型組明顯減少，以中、高劑量組較明顯。IPP分析結(jié)果也顯示:與正常組相比，模型組、低、中、高劑量組Ghrelin陽性表達(dá)率明顯升高(P＜0.05)，經(jīng)治療后，低、中、高劑量組大鼠脂肪Ghrelin陽性表達(dá)率較模型組顯著下降(P＜0.01)。
　　結(jié)論：
　　理論研究:
　　肥胖癥的病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，表現(xiàn)以脾腎虧虛為本，以痰濕、血瘀等為標(biāo)。溫腎健脾化痰方的組方體

11、現(xiàn)了肥胖癥的辨證論治，為運(yùn)用其治療肥胖癥提供了理論依據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)研究:
　　1)溫腎健脾化痰方在控制肥胖模型大鼠體重增加，減輕肝功能損害，減少腹內(nèi)脂肪，降低血清膽固醇及甘油三酯減輕肝臟脂肪變性方面有良好作用。
　　2)溫腎健脾化痰方可調(diào)控食欲，增加能量代謝，抑制脂肪合成，改善糖、脂代謝，減輕肥胖，可能與其通過調(diào)節(jié)肥胖癥模型大鼠的SOCS3mRNA水平來實(shí)現(xiàn)的。
　　3)溫腎健脾化痰方可調(diào)節(jié)肥胖癥模型大鼠Ghre