PDIA3在胎膜早破患者胎盤及胎膜組織中的表達及意義.pdf

1、胎膜早破(PROM）指孕婦胎膜于臨產(chǎn)前發(fā)生自發(fā)性破裂，目前可以據(jù)破膜發(fā)生時的孕周將胎膜早破分為足月胎膜早破(TPROM）和未足月胎膜早破（PPROM）。PROM約占妊娠的10％，80%～90%的PROM在24h內(nèi)自然臨產(chǎn)，90%的PPROM在7天內(nèi)臨產(chǎn)。PROM可致早產(chǎn)率升高，宮內(nèi)感染率升高，圍生兒病死率增加，產(chǎn)褥感染率升高，是圍生期最常見的并發(fā)癥。PROM的病因有許多，但是其基本的病理變化是炎癥、應激反應以及細胞凋亡等，胎盤胎膜處的這

2、些反應不僅可以弱化胎膜結構，也可激活孕婦的免疫系統(tǒng)，引起胎膜破裂。本課題組前期已完成對PPROM和正常足月妊娠患者胎盤組織總蛋白質(zhì)的分離，并用MALDI-TOF/TOF-MS鑒定出16個差異表達的蛋白質(zhì)，選擇其中的蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶（PDI）作為研究對象，PDI是一種主要位于哺乳動物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的巰基-二硫鍵氧化還原酶，屬折疊酶。這種蛋白在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運、鈣穩(wěn)態(tài)、蛋白質(zhì)降解途徑、抗原呈遞、病毒入侵、精子卵子融合、免疫和損傷應激、信號調(diào)控、癌變等

3、方面起重要作用。PDIA3又稱ERp57，是該家族中巰基蛋白氧化還原酶的重要組分，屬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激信號通道蛋白，能催化形成二硫鍵，具有分子伴侶活性。本實驗通過檢測PDIA3在胎膜早破患者胎盤以及胎膜組織中的表達，探討其在胎膜早破發(fā)病機制中發(fā)揮的作用，可能為預防及檢測PROM的發(fā)病提供新的方向。
　　目的:本課題通過研究PDIA3 mRNA及其蛋白在PPROM組，TPROM組，正常足月妊娠組和早產(chǎn)組胎盤胎膜組織中的表達與定位，探討PDI

4、A3在胎膜早破發(fā)生、發(fā)展過程中的作用機制。
　　材料和方法:
　　1.研究對象:收取2013年9月至2014年9月，至河南省婦幼保健院經(jīng)剖宮產(chǎn)分娩的TPROM患者、PPROM患者各30例作為實驗組。同時隨機抽取同時期入院經(jīng)剖宮產(chǎn)分娩的正常足月產(chǎn)、因計劃外妊娠行中孕引產(chǎn)者各30例作為對照組。
　　2.方法
　?。?）運用免疫組織化學 SP法對以上各組胎盤和胎膜組織中的PDIA3蛋白的表達進行定位和半定量檢測。

5、>　　（2）運用實時熒光定量 PCR（RT-PCR）法對以上各組胎盤和胎膜組織中的PDIA3 mRNA的表達進行檢測。
　　3.統(tǒng)計學處理:所有數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計學分析。記量資料用X?S表示，兩組組間符合正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)采用兩獨立樣本 t檢驗，不符合正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)采用Mann Whitney U檢驗。計數(shù)資料用率表示，兩組間比較采用卡方檢驗。以α=0.05為檢驗水準。
　　結果:
　　1.實驗

6、組和對照組患者一般臨床情況的數(shù)據(jù)比較
　　TPROM組、PPROM組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組產(chǎn)婦平均年齡分別為27.1士3.7歲、27.0士4.4歲、26.3士2.9歲、26.6士4.1歲。孕周分別為38.6±1.9周、30.2±1.3周、29.5±1.7周、38.9±1.4周。四組孕婦年齡比較差異無統(tǒng)計學意義；正常足月妊娠組與TPROM組孕周比較，差異無統(tǒng)計學意義；早產(chǎn)組與PPROM組孕周比較，差異無統(tǒng)計學意義。
　　2.

7、實驗組和對照組胎盤組織中PDIA3蛋白的定位和表達
　　在胎盤組織中，PDIA3蛋白主要表達于細胞質(zhì)，經(jīng) SP染色呈黃色顆粒狀，PDIA3蛋白在TPROM組、PPROM組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組胎盤組織中的陽性率分別為93.33%、90.00%、43.33%、60.00%，TPROM組與正常足月妊娠組相比，PDIA3蛋白的表達量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義；PPROM組與早產(chǎn)組相比，PDIA3蛋白的表達量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意

8、義。
　　3.實驗組和對照組胎膜組織中PDIA3蛋白的定位和表達
　　在胎膜組織中，PDIA3蛋白主要表達于細胞質(zhì)，少量位于細胞核和細胞膜，經(jīng)SP染色呈黃色顆粒狀，PDIA3蛋白在TPROM組、PPROM組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組胎膜組織中的陽性率分別為86.67%、83.33%、46.67%、50.00%，TPROM組與正常足月妊娠組相比，PDIA3蛋白的表達量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義；PPROM組與早產(chǎn)組相比，PDI

9、A3蛋白的表達量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　4.實驗組和對照組胎盤組織中PDIA3 mRNA的表達
　　在胎盤組織中，PDIA3 mRNA在TPROM組、PPROM組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組中的相對表達量分別是：2.025±0.180、2.012±0.188、0.995±0.278、0.958±0.418。TPROM組與正常足月妊娠組相比，PDIA3 mRNA的表達量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義；PPROM組與早產(chǎn)組

10、相比，PDIA3 mRNA的表達量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　5.實驗組和對照組胎膜組織中PDIA3 mRNA的表達
　　在胎膜組織中，PDIA3 mRNA在TPROM組、PPROM組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組中的相對表達量分別是：1.440±0.053、1.452±0.056、1.035±0.035、1.024±0.049。TPROM組與正常足月妊娠組相比，PDIA3 mRNA的表達量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義；P