改良型富血小板纖維蛋白促進(jìn)兔顱骨骨再生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過建立兔顱骨的改良型富血小板纖維蛋白(Advanced-Platelet-rich fibrin，A-PRF)骨誘導(dǎo)模型，觀察A-PRF成骨效果，探討A-PRF誘導(dǎo)骨再生過程中誘導(dǎo)新生骨的微觀結(jié)構(gòu)和組織學(xué)特點(diǎn)，評(píng)價(jià)A-PRF修復(fù)骨缺損的特點(diǎn)，為A-PRF在誘導(dǎo)骨再生及頜骨重建的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)參考。
　　方法:標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物日本大耳兔30只隨機(jī)分為A-PRF組和空白組各15只，在兔顱骨骨中縫兩側(cè)均制造一個(gè)6.0 mm的全層洞

2、穿性骨缺損，A-PRF組植入A-PRF膜，空白組不填入任何材料，術(shù)后當(dāng)日、2周、4周、8周、12周術(shù)區(qū)行大體觀察后分別處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，取下術(shù)區(qū)骨標(biāo)本行X線檢查、Micro-CT分析、HE染色、Masson染色、免疫組織化學(xué)分析。
　　結(jié)果:30只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)順利完成，愈合良好，成功建立兔顱骨的A-PRF骨誘導(dǎo)模型，術(shù)區(qū)觀察見A-PRF組A-PRF膜隨著新生骨的增加而逐漸減少，A-PRF膜術(shù)后8周后消失，新生骨術(shù)后4周后形成明顯，術(shù)后

3、8周后逐漸成熟與周圍骨同。空白組骨缺損區(qū)邊界清楚，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，軟組織逐漸長(zhǎng)入骨缺損區(qū)，至術(shù)后12周，未見明顯新骨形成。
　　X線觀察可見:術(shù)后當(dāng)日骨缺損明顯，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，A-PRF組的骨缺損邊緣逐漸模糊，呈現(xiàn)白色高密度影，且呈向心性生長(zhǎng)態(tài)勢(shì)?？瞻捉M至術(shù)后8周骨缺損邊緣霧化，術(shù)后12周骨缺損邊緣見少量白色高密度影。
　　Micro-CT測(cè)量分析:A-PRF組術(shù)后當(dāng)日骨缺損內(nèi)未見骨小梁生成，術(shù)后2周邊緣見少量新骨形成，隨

4、著時(shí)間的延長(zhǎng)，骨小梁逐漸清晰可見且排列規(guī)律，術(shù)后12周時(shí)與周圍正常骨小梁接近?？瞻捉M術(shù)后12周時(shí)仍然清晰可見骨缺損區(qū)，呈低密度影像，骨小梁極少。統(tǒng)計(jì)分析BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp參數(shù)可得出同一時(shí)間節(jié)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組與空白組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　HE染色:A-PRF組術(shù)后當(dāng)日骨缺損區(qū)見大量紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板等結(jié)構(gòu)，術(shù)后2周，骨缺損區(qū)見一種接近骨組織的物質(zhì)形成，術(shù)后4周骨缺損區(qū)見新生的骨小梁，術(shù)后8周

5、、12周骨缺損區(qū)見少量新生骨組織中形成骨髓腔和骨髓?？瞻捉M:術(shù)后當(dāng)日骨組織見未見任何物質(zhì)。術(shù)后2周見少量纖維結(jié)蹄組織長(zhǎng)入，術(shù)后4周纖維結(jié)蹄組織增多，仍未見新骨形成，術(shù)后8周見少量骨細(xì)胞游離期間，未見新骨形成，術(shù)后12周見少量新骨形成，骨小梁細(xì)小，未見骨髓腔和骨髓。
　　Masson染色:A-PRF組和空白組均成紅-藍(lán)相間，A-PRF組在術(shù)后各時(shí)間節(jié)點(diǎn)較空白組紅染區(qū)域更多，更廣。
　　免疫組織化學(xué)分析:RANKL、OPG免疫組

6、織化學(xué)平均光密度分析結(jié)果顯示:A-PRF組RANKL表達(dá)術(shù)后當(dāng)日至術(shù)后2周釋放較平穩(wěn)，術(shù)后2周后逐漸增多，至術(shù)后12周時(shí)仍成上升趨勢(shì)，同一時(shí)間節(jié)點(diǎn)與空白組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，OPG表達(dá)在術(shù)后當(dāng)日釋放逐漸增多，8周達(dá)到高峰后逐漸下降，同一時(shí)間節(jié)點(diǎn)與空白組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。空白組RANKL、OPG表達(dá)均在術(shù)后8周后表達(dá)增多，至觀察期結(jié)束，表達(dá)仍成上升趨勢(shì)。
　　結(jié)論:1.本實(shí)驗(yàn)通過制備兔顱骨的臨界性骨缺損