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文檔簡介
1、目的:引導(dǎo)骨組織再生(Guided Bone Regeneration,GBR)技術(shù)在口腔領(lǐng)域的臨床應(yīng)用十分普遍,包括牙周科、頜面外科、種植等學(xué)科均有廣泛的應(yīng)用。該技術(shù)通過膜的屏障作用,將牙體及種植體周圍的軟硬組織機(jī)械性的分開,防止結(jié)締組織長入,避免纖維組織占據(jù)骨缺損區(qū),維持血凝塊的穩(wěn)定和腔隙的占據(jù),最大程度地為再生骨組織提供足夠必要的空間和環(huán)境,進(jìn)而實現(xiàn)修復(fù)骨缺損的目的。目前,Bio-Gide(R)屏障膜是引導(dǎo)骨組織再生膜臨床應(yīng)用的金
2、標(biāo)準(zhǔn),其主要成分為Ⅰ、Ⅲ型豬真皮膠原的,具有良好的屏障作用,有利于其屏障下方的骨再生修復(fù),但由于高昂的價格極大的限制了其臨床的普及應(yīng)用。因此研制一款屏障作用優(yōu)良,骨傳導(dǎo)性及骨誘導(dǎo)性良好且價格適中的國產(chǎn)化屏障膜具有重大的臨床意義,其市場應(yīng)用前景也十分樂觀。本實驗中所評價的兩種GBR膜,是在清華大學(xué)所帶領(lǐng)的團(tuán)隊下自主研發(fā)的新型膠原膜,其中單層膜為純膠原膜,成分與Bio-Gide(R)相似,但為單層結(jié)構(gòu);雙層膜為復(fù)合膠原膜,整體膠原與羥基磷灰
3、石的比例為90%∶10%,其光滑層為純膠原層,粗糙層為礦化膠原層。本研究通過動物體內(nèi)植入實驗,評價該新型國產(chǎn)引導(dǎo)骨組織再生膠原膜的屏障作用,考察GBR膜屏障下的人工骨材料的早期成骨效果,力求獲得一種新型的引導(dǎo)骨組織再生膠原膜材料,并為其臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
方法:選取2只健康、12-18月齡的Beagle犬作為實驗對象。全麻狀態(tài)下,在所有實驗犬的左側(cè)下頜第二前磨牙(P2)、第三前磨牙(P3)、第四前磨牙(P4)、以及第一磨牙
4、(M1)的頰側(cè)根分叉處,采用磨骨術(shù),利用高速手機(jī)各制備一個大小為5mm×5mm×5mm的骨缺損,制備過程是在X光片的參照下進(jìn)行,避免損傷牙神經(jīng)。沖洗創(chuàng)面,在四個缺損中分別填入骼金(R)人工骨材料,P2缺損作為對照組不再做處理(A組)。于P3的骨充填材料表面覆蓋Bio-Gide(R)膠原屏障膜(B組),P4表面覆蓋單層膠原屏障膜(C組),M1表面覆蓋雙層膠原屏障膜(D組),之后縫合。四周后對兩只實驗犬的右側(cè)下頜骨進(jìn)行相同的術(shù)式,處死前14
5、d、13d注射25mg/kg的茜紊紅,之前4d、3d注射20mg/kg的鈣黃綠素。于第一次實驗八周后灌注處死收集標(biāo)本。通過大體觀察、X線檢查、骨組織熒光切片以及硬組織骨磨片Goldner's三色染色法,鏡下觀察并分析缺損區(qū)分別在4周和8周時的組織修復(fù)情況,同時借助統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS17.0對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行計算分析,以探討兩種新型屏障膜材料早期修復(fù)骨缺損的能力。
結(jié)果:術(shù)后Beagle犬無異常表現(xiàn),無死亡,無炎癥反應(yīng),口內(nèi)縫合處恢
6、復(fù)良好,牙周質(zhì)地色澤健康。X光顯示,4周時,對照組缺損區(qū)周圍可見新骨生成,骨白線模糊不清,中央部位可見明顯缺損影像。實驗組之間區(qū)別并不明顯,新生骨的密度均低于原始骨質(zhì)。術(shù)后8周,實驗組的X線表現(xiàn)為缺損處骨質(zhì)增生,可見骨密度較之4周升高,缺損區(qū)域均比對照組更小。熒光劑雙色標(biāo)記顯示,測得三組實驗組以及一組對照組中,茜素紅及鈣黃綠素所成兩條熒光帶間的平均距離,統(tǒng)計學(xué)分析,得到兩條熒光帶間的距離,最終求得平均礦化率(μm/d)。四周:A組:1.
7、2±0.329μm/d、B組:2.594±0.558μm/d、C組:1.267±0.304μm/d、D組:2.877±0.321μm/d;八周:A組:1.616±0.298μm/d、B組:4.1±0.85μm/d、C組:1.902±0.165μm/d、D組:3.582±0.376μm/d。經(jīng)獨立樣本t檢驗計算結(jié)果顯示,有屏障膜覆蓋的三個實驗組成骨速率要高于對照組,A和B、A和D、C和D之間具有顯著性,顯著性P<0.01;B和D、A和C之
8、間則沒有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。Goldner's三色法染色骨磨片光學(xué)顯微鏡下觀察可見,實驗組有分布較廣的骨小梁,骨質(zhì)豐富,骨小梁之間為大量且均勻分散的成骨細(xì)胞;對照組中包括編織骨及板層骨,成骨細(xì)胞較實驗組稀疏,骨小梁分布廣泛且數(shù)量較少。
結(jié)論:在本實驗條件下,單層膠原膜、雙層納米羥基磷灰石膠原復(fù)合膜均有較好的屏障作用,無纖維結(jié)締組織長入。本實驗條件下,人工骨材料的骨礦化沉積率(MAR)在雙層納米羥基磷灰石膠原復(fù)合膜組合與Bio-G
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