藍(lán)萼甲素生物素標(biāo)記物合成.pdf

1、藍(lán)萼甲素是唇形科香茶菜屬植物藍(lán)萼香茶菜提取出來的二萜化合物，是藍(lán)萼香茶菜中的主要活性成分。近年來，對(duì)此種二萜類化合物抑制腫瘤，抗病毒抑菌，對(duì)心血管系統(tǒng)保護(hù)及抗癌活性研究，已經(jīng)成為當(dāng)代天然藥物化學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。而生物素-親和素系統(tǒng)是一種具有高親和力、靈敏度高、特異性強(qiáng)和穩(wěn)定性好的信號(hào)放大標(biāo)記技術(shù)，由于該標(biāo)記技術(shù)具有優(yōu)秀的性質(zhì)，因此很快滲透到很多個(gè)學(xué)科，在細(xì)胞和抗原的定位和檢測(cè)有相當(dāng)重要的作用。
　　本文首先對(duì)生物素與6-氨基己酸、

2、3-氨基苯甲酸、對(duì)氨基苯甲酸、4-氨基-3-甲基苯甲酸、3-氟-4-氨基苯甲酸反應(yīng)得出5種不同的生物素延長(zhǎng)鏈，生物素與6-氨基己酸延長(zhǎng)后再次與6-氨基己酸反應(yīng)形成第6種生物素延長(zhǎng)鏈。然后生物素以及6種不同生物素延長(zhǎng)鏈與藍(lán)萼甲素進(jìn)行酯化反應(yīng)。一共得出14個(gè)不同的藍(lán)萼甲素生物素標(biāo)記。并且對(duì)部分藍(lán)萼甲素生物素標(biāo)記物進(jìn)行體外抗腫瘤活性測(cè)試，初步得出了抗腫瘤活性較好的藍(lán)萼甲素生物素標(biāo)記物。在藍(lán)萼甲素生物素標(biāo)記物的合成過程中，發(fā)現(xiàn)了藍(lán)萼甲素生物素標(biāo)

3、記物?；谀承┤軇┲锌梢园l(fā)生7位羥基以及14位羥基之間相互轉(zhuǎn)移，因此以生物素直接連接藍(lán)萼甲素的產(chǎn)物Y1-1(14位羥基取代)和Y1-2(7位羥基取代)分別進(jìn)行溶劑變構(gòu)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)表明Y1-1以及Y1-2濃度為0.5 mg?ml-1在甲醇、二甲基亞砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)、二氯甲烷、三氯甲烷、三溴甲烷中，二氯甲烷、三氯甲烷、三溴甲烷有相對(duì)明顯的?；D(zhuǎn)移效應(yīng)，而在甲醇也有微弱的?；D(zhuǎn)移效應(yīng)，在DMSO、DMF中基本不發(fā)生?；D(zhuǎn)移

4、效應(yīng)。另外我們也發(fā)現(xiàn)了與藍(lán)萼甲素具有類似結(jié)構(gòu)的冬凌草甲素，在生物素化后的產(chǎn)物Y11-1(14位羥基取代)、Y11-2(7位羥基取代)，其0.5 mg?ml-1的三氯甲烷溶液中也有微弱的酰基轉(zhuǎn)移效應(yīng)。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)了0.5 mg?ml-1的藍(lán)萼乙素和0.5 mgml-1藍(lán)萼丁素能在三氯甲烷溶液中相互變化。但是生物素化后的藍(lán)萼丙素卻不能發(fā)生類似的?；D(zhuǎn)移現(xiàn)象，由此初步得出藍(lán)萼甲素?；D(zhuǎn)移的化學(xué)條件以及初步的反應(yīng)機(jī)理。藍(lán)萼甲素生物素標(biāo)記物的合成為