菊連升板顆粒對小鼠原發(fā)免疫性血小板減少癥的治療作用.pdf

1、目的:原發(fā)免疫性血小板減少癥也稱作特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)，是最常見的一種血小板減少性疾病。此病起病緩慢，常出現(xiàn)四肢皮膚散在的瘀點、瘀斑，牙齦出血或鼻出血，女性病人月經(jīng)過多也較為常見，多伴有舌質(zhì)紅，舌苔黃，脈數(shù)。上述癥狀可反復(fù)發(fā)作，持續(xù)數(shù)周、數(shù)月或數(shù)年不等。部分病人可因感染等致使病情突然加重而出現(xiàn)廣泛且嚴重的內(nèi)臟出血，也可因情緒激動而誘發(fā)致命性的顱內(nèi)出血。西藥治療主要應(yīng)用潑尼松等激素及免疫抑制劑，反復(fù)應(yīng)用會產(chǎn)生嚴重不良反應(yīng)，患者

2、依從性差，病程越長療效也越差，越來越多的患者選擇中醫(yī)藥治療。中醫(yī)根據(jù)ITP臨床表現(xiàn)，辨證分型為血熱妄行、陰虛血熱、氣虛不攝和瘀血內(nèi)阻等四型，其中血熱妄行型發(fā)病率較高，主要表現(xiàn)為肌膚斑色鮮紅或紫暗，可有口渴，溺赤便秘，舌紅，苔黃，脈滑數(shù)或弦數(shù)。目前，臨床針對此型的中成藥療效不一，本研究通過建立特發(fā)性血小板減少性紫癜的動物模型，考察菊連升板顆粒治療ITP的療效并分析其作用機理，為臨床應(yīng)用提供實驗支持。
　　方法:造模方法采用改良后的免

3、疫法，先制作豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)。選用健康BALB/C雌性小鼠，隨機分為6組:正常對照組、模型組、潑尼松組、菊連升板顆粒高、中、低劑量組，每組12只，除正常對照組外，其余5組均為實驗組。將實驗組BALB/C小鼠分別于1、3、5、7、9、11、13天，腹腔注射GP-APS，建立ITP動物模型。同時給正常對照組小鼠腹腔注射0.9％氯化鈉溶液。
　　造模后分組灌胃給藥:潑尼松組:10mg/kg/d（相當于臨床用量10倍）

4、;菊連升板顆粒低劑量組:2.5g/kg/d（相當于臨床用量5倍）;菊連升板顆粒中劑量組:5g/kg/d（相當于臨床用量10倍）;菊連升板顆粒高劑量組:10g/kg/d（相當于臨床用量20倍）;正常對照組和模型組給予等量蒸餾水。取小鼠外周血，利用全自動血液分析儀分別測定造模后和治療一周后血小板計數(shù)的變化情況;取股骨和胸骨小鼠骨髓涂片染色后，顯微鏡下觀察測定巨核細胞總數(shù)變化以及骨髓巨核細胞系不同形態(tài)細胞的比例變化;取小鼠外周血清以ELISA

5、法檢測細胞因子IFN-γ、 IL-4變化情況。
　　結(jié)果:1造模后，各實驗組小鼠的血小板計數(shù)比正常對照組明顯減少，有顯著性差異(P＜0.05);治療一周后，與模型組相比，各用藥組的血小板數(shù)明顯增加，均有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）;潑尼松組、菊連升板顆粒高劑量組與正常對照組比較，血小板計數(shù)非常接近，統(tǒng)計分析沒有顯著性差異（P＞0.05）。
　　2與正常對照組相比，模型組巨核細胞總數(shù)明顯升高，有顯著性差異(P＜0.05);用藥各

6、組巨核細胞總數(shù)與模型組相比均有不同程度恢復(fù)，有顯著性差異（P＜0.05）;模型組產(chǎn)板型巨核細胞比例明顯降低，與正常對照組相比有顯著性差異(P＜0.05);潑尼松組、菊連升板顆粒各個劑量組產(chǎn)板巨核細胞比例明顯增加，與模型組比較均有顯著差異(P＜0.05);潑尼松組、菊連升板顆粒大劑量組的產(chǎn)板巨核細胞比例與正常對照組相近，沒有顯著性差異(P＞0.05)。
　　3與正常對照組比較，模型組IFN-γ水平升高，IL-4水平下降，IFN-γ/

7、IL-4比值明顯升高，具有顯著性差異（P＜0.05）;與模型組比較，潑尼松組、菊連升板顆粒各劑量組均能降低小鼠IFN-γ水平，提高IL-4水平，IFN-γ/IL-4比值降低，具有顯著性差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論:本實驗證明菊連升板顆粒治療ITP具有以下幾個作用:(1)提升血小板數(shù);(2)減少異常增多的骨髓巨核細胞總數(shù)，并使其并向成熟方向分化，增加產(chǎn)板巨核細胞數(shù);(3)調(diào)節(jié)T細胞亞群比例失衡，糾正免疫功能紊亂。
　　其作