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文檔簡(jiǎn)介
1、楊屬植物分布于世界各地、可以適應(yīng)各種多變的氣候。楊屬植物為木本植物研究的模式植物。它具有相對(duì)成熟的無性快速繁殖體系,遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)成熟,基因組小(是擬南芥基因組的4倍,與水稻基因組大小相似,比松樹基因組小40至50倍,約450-550Mbp)等特點(diǎn)。楊屬植物中的毛果楊(Populus trichocarpa)其基因組序列已經(jīng)全部測(cè)出,這使得楊屬植物成為木本植株轉(zhuǎn)基因研究的模式樹種。
為了研究毛白楊中MADS-box基因的功能,我
2、們從毛白楊(Populous tomentosaCarr.)形成層中提取了三個(gè)MADS-box基因,分別命名為PtMADS1、PtMADS2、PtMADS3,并構(gòu)建了其中PtMADS1的反義表達(dá)載體。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化毛白楊,獲得了35S∷PtMADS1反義表達(dá)植株。通過對(duì)野生型及轉(zhuǎn)基因植株的表達(dá)及表型分析,為研究PtMADS1基因功能提供了證據(jù),并為深入研究基因的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:
第一,蛋白同源性分析
3、。PtMADS1與擬南芥SVP(AGL22)和AGL24的同源性最高為70%和65%,PtMADS2與AGL12同源性最高為65%,PtMADS3與AGL14和AGL19同源性最高,蛋白的相同性分別為60%,蛋白的相同性為66.4%。結(jié)果顯示PtMADS1、PtMADS2、PtMADS3均屬于孤單型,且均屬于MICK組,且PtMADS1基因?qū)儆赟TMAS11一組,PtMADS3屬于AGL12一組,PtMADS3屬于SOC1/TM3組。<
4、br> 第二,PtMADS1基因于野生型的莖尖中表達(dá),在幼葉中檢測(cè)到其表達(dá),在根、莖、葉、雌花序中不表達(dá)。在野生型植株中,PtMADS1在莖尖的表達(dá)較強(qiáng),在幼葉中表達(dá)較弱。
PtMADS1的反義轉(zhuǎn)基因植株的表型有葉尖較野生型稍長(zhǎng),基部楔形,葉片無絨毛。其組培芽特點(diǎn)如下,第一,轉(zhuǎn)基因型產(chǎn)生的芽的數(shù)量較多。第二,轉(zhuǎn)基因型產(chǎn)生的芽結(jié)構(gòu)不正常,常表現(xiàn)為棒狀、花瓣?duì)睿@些芽體往往不能分化。第三,葉片較野生型長(zhǎng)且窄,類似線狀。第四,葉片
5、呈現(xiàn)枝條狀。線狀葉片上有大量生長(zhǎng)點(diǎn)結(jié)構(gòu),而且葉片上往往再生出葉片。PtMADS1反義轉(zhuǎn)基因芽體轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基(RM)上,不能生根,產(chǎn)生愈傷組織。愈傷組織接至不添加任何激素的MS培養(yǎng)基可產(chǎn)生芽體。將35S∷PtMADS1反義轉(zhuǎn)基因芽體轉(zhuǎn)入MS培養(yǎng)基上,不生根,但能產(chǎn)生大量芽體。
通過PtMADS1反義轉(zhuǎn)基因毛白楊的表達(dá)及表型分析,我們得知,PtMADS1應(yīng)在營(yíng)養(yǎng)頂端分生組織中起作用。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果為我們研究PtMADS1基
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