bFGF和NMDA受體在神經(jīng)病理性疼痛中的相互調(diào)控作用.pdf

1、第一部分 NMDA受體拮抗劑對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓背角bFGF表達(dá)的影響
　　目的：探討鞘內(nèi)間斷多次給予N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸（NMDA）受體拮抗劑對(duì)坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷模型(SNI)大鼠神經(jīng)病理性疼痛的緩解作用及其可能的機(jī)制。
　　方法：72只雄性SD大鼠隨機(jī)分為6組(n=12)：假手術(shù)組(S組)、坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷組(NP組)、氯胺酮低劑量組（K1組）、氯胺酮高劑量組(K2組)、MK-801低劑量組(M1組)、

2、MK-801高劑量組（M2組）。S組僅暴露坐骨神經(jīng)，NP組、K1組、K2組、M1組、M2組制備坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷模型。從術(shù)后1d開(kāi)始，K1組、K2組、M1組、M2組通過(guò)鞘內(nèi)置管分別注射氯胺酮50ug、氯胺酮100ug、MK-8015ug和MK-80110ug，容量均為10ul，S組和NP組通過(guò)鞘內(nèi)置管注射0.9％生理鹽水10ul，1次/d，連續(xù)給藥7d。分別于術(shù)前1d和術(shù)后1-7d，進(jìn)行疼痛行為學(xué)觀察和機(jī)械刺激縮足反射閾值(PWMT

3、)測(cè)定。術(shù)后第7d處死大鼠取L4~6節(jié)段脊髓，免疫組化測(cè)定膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)表達(dá)變化，Western blot檢測(cè)bFGF蛋白表達(dá)變化。
　　結(jié)果：與S組比較，NP組PWMT明顯降低(P<0.05)，bFGF、GFAP蛋白含量明顯升高(P<0.05)；與NP組比較，K1組、K2組、M1組和M2組PWMT出現(xiàn)升高(P<0.05)，bFGF、GFAP蛋白含量明顯降低(P<0.05)，并成劑

4、量依賴性。
　　結(jié)論：鞘內(nèi)間斷多次給予NMDA受體拮抗劑可緩解SNI引起的大鼠痛覺(jué)過(guò)敏，其機(jī)制可能與抑制bFGF蛋白表達(dá)及星形膠質(zhì)細(xì)胞活化有關(guān)。
　　第二部分 bFGF對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓NMDA受體表達(dá)的影響
　　目的：探討堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)在大鼠神經(jīng)病理性疼痛中的作用及對(duì)脊髓N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸（NMDA）受體亞基表達(dá)的影響。
　　方法：48只雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（A組）、假手

5、術(shù)+ bFGF抗體組（B組）、SNI組（C組）、SNI+bFGF抗體組（D組），每組12只。制備坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷(SNI)模型。其中B組和D組于建模后1d、6d、9d、13d、16d、20d蛛網(wǎng)膜下腔注入稀釋至40ul的bFGF抗體18μg。A組和C組則在同一時(shí)間注射等體積磷酸鹽緩沖液（PBS）。分別于術(shù)前1d和術(shù)后1d、4d、7d、14d、21d測(cè)定機(jī)械刺激縮足反射閾值（PWMT）。術(shù)后第21d處死大鼠取L4~6節(jié)段脊髓，免疫組

6、化測(cè)定膠質(zhì)纖維酸性蛋白（ GFAP）表達(dá)， RT-PCR及Western blot檢測(cè)NMDA受體亞基NR1、NR2A、和NR2B表達(dá)變化。
　　結(jié)果：與A組和B組比較，C組和D組PWMT降低，脊髓GFAP、NR1和NR2B表達(dá)升高（P<0.05）。與C組比較，D組PWMT升高，脊髓GFAP、NR1和NR2B表達(dá)降低（P<0.05）。
　　結(jié)論：鞘內(nèi)注射bFGF抗體能緩解SNI大鼠神經(jīng)病理性疼痛，其機(jī)制可能與其調(diào)節(jié)NR1和N