吸入氫氣對(duì)慢性低氧性肺動(dòng)脈高壓的影響.pdf

1、目的：探索吸入氫氣對(duì)慢性低氧性肺動(dòng)脈高壓的影響。
　　方法：(1)動(dòng)物的分組及缺氧處理：將30只，4-6周大健康雄性清潔級(jí)C57小鼠(四川省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，重量（18-22）g，隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組（Control）、缺氧組（Hypoxia）、缺氧+氫氣吸入組（Hypoxia+H2）每組10只?？瞻捉M不做任何處理；缺氧組予置于氧倉(cāng)吸入低氧混合氣體（10％O2+90%N2），每天8小時(shí)，其余時(shí)間置于常氧，持續(xù)28天；缺氧+氫氣吸

2、入組在低氧混合氣體中加入氫氣（10%O2+4%H2+86%N2），其他與缺氧組相同。低氧處理28天后，取組織標(biāo)本檢查；(2)慢性缺氧模型檢驗(yàn)：28天缺氧暴露結(jié)束后，予3%戊巴比妥鈉（25mg/kg）腹腔注射，氣管插管，頸動(dòng)脈采血后，即查血常規(guī)，統(tǒng)計(jì)三組的紅細(xì)胞、血紅蛋白;(3)評(píng)估肺動(dòng)脈高壓（Pulmonary arterial hypertension，PAH）模型：造模完成后，開(kāi)胸取出心臟組織，分離左右心室并稱重，求得心室肥厚指數(shù)。

3、取同一側(cè)同一肺段，4%多聚甲醛固定后，切片，HE染色，使用image processing program6.0測(cè)量小血管內(nèi)外徑，通過(guò)心室肥厚指數(shù)和肺微小動(dòng)脈增生兩項(xiàng)間接指標(biāo)來(lái)反映;(4)肺損傷評(píng)估：肺組織HE染色后。使用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察，參照Mikawa方法進(jìn)行肺病理評(píng)分;(5)肺組織炎性因子測(cè)定：肺組織勻漿后，提取組織液，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測(cè)。

4、(6)肺組織丙二醛（malondialdehyde，MDA）測(cè)定：肺組織勻漿后，提取組織液，定量肺組織MDA。
　　結(jié)果：(1)紅細(xì)胞、血紅蛋白測(cè)定：缺氧組與缺氧+氫氣吸入組紅細(xì)胞數(shù)目和血紅蛋白量均增高，符合慢性缺氧血液系統(tǒng)變化，但缺氧組的變化最為顯著;(2)心室肥厚指數(shù)（Right Ventricular Hypertrophy Index，RVHI）和肺血管中膜厚度百分比（Wall thickness percentage，M

5、T%）測(cè)定：缺氧組和缺氧+氫氣吸入組與對(duì)照組相比，RVHI均增高。缺氧組MT%增高，符合肺動(dòng)脈高壓的病理學(xué)改變，氫氣吸入可改善PAH;(3)肺損傷評(píng)估：缺氧組肺病理評(píng)分較對(duì)照組增高，出現(xiàn)了肺組織間隙的充血和炎細(xì)胞的浸潤(rùn)。缺氧+氫氣吸入組無(wú)明顯的肺損傷表現(xiàn);(4)炎性因子和MDA的檢測(cè)：Elisa測(cè)得腫瘤壞死因子（Turmor necrosis factor-α，TNF-α）和中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶（Neutrophil elastase，