糖酵解抑制劑2-脫氧葡萄糖減輕LPS-D-Gal誘導(dǎo)的急性肝損傷.pdf

1、目的：熱量限制（calorie restriction，CR）是在不導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)不良的情況下減少日常熱量攝入，可有效延長(zhǎng)壽命、改善健康。但由于持續(xù)強(qiáng)烈的饑餓感等原因，CR在普通人群中的推廣難以實(shí)現(xiàn)。近年來有些學(xué)者采用工具藥在動(dòng)物模型中干預(yù)CR中的關(guān)鍵調(diào)控靶點(diǎn)、模擬CR的保護(hù)效應(yīng)，獲得了較好的療效，并提出了CR模擬劑（calorie restriction mimetic，CRM）的新概念。糖酵解抑制劑2-脫氧葡萄糖（2-deoxygluco

2、se，2-DG）是代表性的CRM。本文在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）/半乳糖胺（D-galactosamine，D-Gal）誘導(dǎo)的小鼠急性致死性肝損傷模型中觀察了2-DG對(duì)肝損傷的調(diào)節(jié)效應(yīng)并初步探討了其可能的機(jī)制。
　　方法：雄性BALB/c小鼠腹腔注射LPS/D-Gal誘導(dǎo)急性致死性肝損傷；在LPS/D-Gal處理前0.5小時(shí)腹腔注射空白溶劑或不同濃度的2-DG。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分為三部分：第一部分建立模型后1

3、.5小時(shí)麻醉處死小鼠，采集血漿樣本，用ELISA試劑盒測(cè)量血漿中TNF-α水平；第二部分建立模型后6小時(shí)采集血漿和肝組織樣本，檢測(cè)血漿中ALT和AST水平，檢測(cè)肝組織中的丙二醛（malondialdehde，MDA）含量、髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）水平、caspase-3、-8、-9活性、激活型caspase-3和磷酸化JNK蛋白含量，肝組織經(jīng)固定、包埋、切片后， HE染色觀察組織病理學(xué)改變、TUNEL法檢測(cè)

4、肝細(xì)胞凋亡情況；第三部分建立模型后，每6小時(shí)觀察一次，記錄各組小鼠生存率。
　　結(jié)果：本研究表明2-DG可減輕LPS/D-Gal誘導(dǎo)的致死性肝損傷、下調(diào)LPS/D-Gal激活的促凋亡信號(hào)。具體表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：
　?。?）2-DG抑制LPS/D-Gal誘導(dǎo)的血漿中ALT、AST水平的升高，降低LPS/D-Gal暴露小鼠肝組織中MPO、MDA的水平，減輕LPS/D-Gal誘導(dǎo)的肝組織病理學(xué)損傷；
　?。?）2-DG抑制

5、LPS/D-Gal誘導(dǎo)的促凋亡炎癥因子TNF-α的產(chǎn)生；
　?。?）2-DG抑制LPS/D-Gal誘導(dǎo)的促凋亡信號(hào)分子JNK的磷酸化激活；
　　（4）2-DG抑制LPS/D-Gal誘導(dǎo)caspase-3、-8、-9的激活、下調(diào)激活型caspase-3的蛋白水平、抑制LPS/D-Gal誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡；
　?。?）2-DG可降低LPS/D-Gal處理小鼠的死亡率。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明2-DG對(duì)LPS/D-Ga