桃花多酚對AD模型大鼠相關(guān)蛋白及學(xué)習(xí)行為的影響.pdf

1、背景：
　　阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）是一種不可逆性的、大腦重要功能逐漸衰退性的疾病，主要表現(xiàn)為進(jìn)行性認(rèn)知障礙以及記憶力損害為主要的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性的疾病。AD屬于一種常見的心境障礙，其病理生理機(jī)制相對比較復(fù)雜，并且發(fā)病機(jī)制迄今也尚未清楚。隨著人口的老齡化以及社會壓力增大等諸多因素的影響，AD的發(fā)病率會越來越高，嚴(yán)重影響人類的健康以及生活質(zhì)量，AD通俗點(diǎn)說指的是我們現(xiàn)在所稱的老年性癡呆，或者是早

2、老性癡呆。到目前為止，還沒有任何有效的而且能夠治療和阻斷AD的方法。所以，假如患上AD，就只有等待大腦功能逐漸的衰竭，直到死亡。
　　目的：
　　探討桃花多酚對阿爾茨海默病大鼠記憶行為能力及相關(guān)蛋白的影響。
　　方法：
　　取健康成年大鼠50只，自由進(jìn)食，飲用1％蔗糖水3d，使動物原來的飲水習(xí)慣發(fā)生改變。大鼠經(jīng)10％水合氯醛腹腔麻醉后，在前囟后3.5 mm，中線向左旁開2 mm處確定注射點(diǎn)。40只用于造模，用微量

3、注射器向腦組織內(nèi)緩慢注射Aβ1-402μL(10μg)，10只用于對照Sham組選擇相同部位注入等量生理鹽水，肌注青霉素40萬u/d抗感染，連續(xù)5d。自由進(jìn)食飲水，觀察兩天。然后進(jìn)行MORRIS水迷宮測驗，計算大鼠的平均逃避潛伏期值，造模陽性是指每只大鼠逃避潛伏期與平均逃避潛伏期之差值占平均逃避潛伏期的比值＞20％。從造模陽性的動物中隨機(jī)抽取30只，隨機(jī)分為模型組(Modelgroup，MG)、PBP-L劑量組(20mg/kg)、PBP

4、-H劑量組(80mg/kg)，之后每日灌胃給藥1次，連續(xù)給藥28d，Sham組(Shams group，SG)和MG大鼠灌胃等量的蒸餾水。水迷宮實驗檢測大鼠行為改變，檢測海馬組織PSD-95、S100β蛋白分子免疫組織化學(xué)及免疫熒光抗體的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　水迷宮檢測表明，Model組在目標(biāo)象限尋覓的時間即逃避潛伏期較Sham組明顯延長，PBP-L和PBP-H干預(yù)組與Model組相比逃避潛伏期顯著減少(P＜0.05）

5、。Model組動物與Sham組動物相比，目標(biāo)象限空間探索能力下降顯著，在單位時間內(nèi)跨越原來平臺的次數(shù)減少，且目標(biāo)象限停留時間減少，均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01);實驗干預(yù)組PBP-L和PBP-H在原平臺所在的象限逗留的時間比較長，并且在單位時間內(nèi)跨越原平臺次數(shù)較Model組顯著增加(P＜0.01)。模型組動物與正常對照組動物相比，海馬組織中總抗氧化能力及海馬組織中SOD活力下降、MDA含量增加(P＜0.01);而PBP-L和PBP-

6、H實驗干預(yù)組與模型組比總抗氧化能力及SOD活力顯著增加、MDA含量顯著下降(P＜0.01)，免疫組化檢測結(jié)果表明Sham組僅見少量的PSD-95、S100-β免疫組化陽性細(xì)胞，細(xì)胞著色比較淺;Model組的PSD-95、S100-β蛋白表達(dá)較多，細(xì)胞著色較深，顆粒增粗，其OD值與Sham組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01); PBP-L和PBP-H組PSD-95、S100-β陽性細(xì)胞表達(dá)比Model組有所減少，同時，細(xì)胞著色OD值較M

7、odel組下降(P＜0.01);通過熒光顯微鏡觀察，Model組可見PSD-95蛋白及S100-β蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞呈現(xiàn)聚集或散在分布，其分布在海馬細(xì)胞層，而在Sham組中，綠色熒光細(xì)胞數(shù)明顯少于Model組(P＜0.01)。PBP-L和PBP-H實驗干預(yù)組陽性細(xì)胞表達(dá)亦較Model組有所減少，差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。Western blot檢測發(fā)現(xiàn):Model組中PSD-95、S100-β蛋白表達(dá)水平較Sham組均明顯升

8、高(P＜0.05); PBP-L和PBP-H組中PSD-95、S100-β蛋白表達(dá)較Model組顯著降低(P＜0.05）。通過透射電鏡觀察Model組海馬組織可見凝聚于核周邊呈新月形細(xì)胞，核膜損傷，細(xì)胞內(nèi)含有大量的脂褐素細(xì)胞膜系結(jié)構(gòu)，核染色質(zhì)電子密度增強(qiáng)，胞質(zhì)空泡化，胞膜破裂，細(xì)胞出現(xiàn)崩解，形成了典型的細(xì)胞凋亡特征，PBP-L和PBP-H實驗干預(yù)組細(xì)胞病理改變較Model組明顯減輕，海馬CA1區(qū)異常神經(jīng)元較Model組明顯減少。