尼莫地平對(duì)AD大鼠模型腦組織NO、AchE的影響.pdf

1、目的：尼莫地平(Nimodipine，NIM)，化學(xué)名2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-1，4-二氫-3,5-吡啶二甲酸-2-甲氧乙基-(1-甲乙基)酯，是1，4-二氫吡啶類鈣通道拮抗劑，NIM特點(diǎn)易透過血腦屏障。大腦皮質(zhì)、海馬、丘腦等結(jié)構(gòu)，含有高密度的二氫吡啶結(jié)合部位，所以NIM可能對(duì)阿爾茨海默病(Alzheimer disease AD)的治療作用更優(yōu)于其他類鈣拮抗劑。NIM能有效防止細(xì)胞內(nèi)“鈣超載”造成的病理狀態(tài)和損害。動(dòng)物實(shí)

2、驗(yàn)證明它能增加動(dòng)物的探究行為，改善學(xué)習(xí)記憶功能。臨床試驗(yàn)證明可改善病人的記憶、認(rèn)知和語(yǔ)言表達(dá)能力，運(yùn)動(dòng)失調(diào)、走路障礙和行為舉止異常有所減輕，情緒狀況和睡眠情況也有改善。1994年Khachaturian提出的AD的鈣穩(wěn)態(tài)學(xué)說，認(rèn)為細(xì)胞鈣離子(Ca2+)濃度的持續(xù)升高會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞損傷和凋亡。細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明Ca2+穩(wěn)態(tài)失衡與AD病理特點(diǎn)有關(guān)。其中，高Ca2+活化氧化氮合酶，產(chǎn)生一氧化氮(nitric oxide NO)，NO作為一

3、種自由基參與了AD腦細(xì)胞死亡過程。實(shí)驗(yàn)證明海馬內(nèi)NO的表達(dá)和學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān)。在血管性癡呆(VaD)時(shí)腦脊液中NO濃度與癡呆程度呈正相關(guān)。由于NO在中樞神經(jīng)系統(tǒng)參與多種病理和生理作用，并且與Ca2+升高形成惡性循環(huán)，即Ca2+升高加重自由基的生成，自由基的生成又加重了Ca2+的堆積。故有效控制這一惡性循環(huán)為治療AD提供了一個(gè)思路。臨床還發(fā)現(xiàn)AD患者出現(xiàn)膽堿能神經(jīng)功能缺乏的癥狀，并且在實(shí)驗(yàn)室用損毀膽堿能神經(jīng)的辦法可以成功制作AD模型，由此

4、判斷中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)在學(xué)習(xí)記憶過程中起著非常重要的作用，也證明膽堿能神經(jīng)元的退化是造成AD的重要病理因素。因此目前老年癡呆的治療中應(yīng)用最多的也是膽堿能藥物。由于Ca2+在神經(jīng)生理和神經(jīng)信息傳遞方面發(fā)揮著重要的作用，故重建Ca2+穩(wěn)態(tài)可能有助于中樞膽堿能神經(jīng)的恢復(fù)。本實(shí)驗(yàn)旨在應(yīng)用AD大鼠模型，通過觀察各組實(shí)驗(yàn)大鼠腦組織NO、AchE含量的差異，及Morris迷宮實(shí)驗(yàn)的比較，以探討NIM治療AD的有效性及重建Ca2+穩(wěn)態(tài)后NO、AchE含

5、量的變化，由此推斷NIM使Ca2+平衡恢復(fù)后，進(jìn)一步的作用與NO、AchE含量的相關(guān)性。
　　 方法：隨機(jī)取健康Wistar雄性大鼠40只，在分組前進(jìn)行迷宮訓(xùn)練，然后隨機(jī)選取30只大鼠進(jìn)行腦穿刺注射Aβ25-35造模，將造模前后游迷宮數(shù)據(jù)記錄、比較，根據(jù)迷宮數(shù)據(jù)取20只成功的AD大鼠模型，隨后將20只大鼠分為兩組，即模型組和尼莫地平組，另取10只正常大鼠設(shè)為空白對(duì)照組，尼莫地平組給于NIM進(jìn)行干預(yù)。2周后再進(jìn)行迷宮實(shí)驗(yàn)，比較各組

6、大鼠游迷宮的差異。3周后各組大鼠斷頭取腦，進(jìn)行腦組織NO、AchE檢測(cè)，所得數(shù)據(jù)進(jìn)行組間比較。
　　 結(jié)果與結(jié)論：⑴造模前后游迷宮的數(shù)據(jù)比較發(fā)現(xiàn)，t=2.967，有顯著性差異(P＜0.01)。表明AD大鼠模型制作成功。藥物干預(yù)后模型組、空白對(duì)照組和NIM組游迷宮數(shù)據(jù)比較，差異明顯，其中第六天F=86.78，(P＜0.01)，證明NIM有改善記憶功能的作用，對(duì)AD大鼠模型學(xué)習(xí)記憶功能的恢復(fù)有幫助作用。⑵指標(biāo)NO三組間比較，F(xiàn)=79

7、.302，P＜0.01，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步采用LSD-t的方法進(jìn)行兩兩比較，空白對(duì)照組與模型組比較t=3.963，尼莫地平組與模型組比較t=2.831，尼莫地平組與空白對(duì)照組比較t=2.922，結(jié)果均(P＜0.01)差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明NIM對(duì)AD的治療作用與降低腦組織NO含量有關(guān)。⑶指標(biāo)ACHE三組間比較，F(xiàn)=37.56，P＜0.01，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步采用LSD-t的方法進(jìn)行兩兩比較，空白對(duì)照組與模型組比較t=2.86