化瘀通絡(luò)中藥對糖尿病腎病大鼠的干預(yù)作用及其對腎臟結(jié)締組織生長因子表達的影響.pdf

1、目的:糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy, DN）是泛指糖尿病導(dǎo)致的腎小球病變，明顯的病變是細胞外基質(zhì)增生，是糖尿病發(fā)展到一定程度出現(xiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥。本實驗通過高脂飼料喂養(yǎng)后聯(lián)合腹腔注射小劑量鏈脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）來建立糖尿病大鼠模型，分別給予化瘀、通絡(luò)中藥及厄貝沙坦進行干預(yù)并觀察大鼠，通過觀察大鼠的一般情況、生化指標(biāo)、腎臟病理變化，以及檢測24小時尿蛋白定量、血常規(guī)、及腎組織內(nèi)結(jié)締組織生長因

2、子（connective tissue growth factor, CTGF）表達水平，研究化瘀通絡(luò)中藥的作用，并探討其可能的作用機制。為臨床糖尿病腎病的防治提供理論依據(jù)。
　　方法:雄性健康SD大鼠70只，隨機分為正常對照組10只，模型組60只，模型組采用高糖高脂飼料喂養(yǎng)四周后一次性腹腔注射STZ35mg/kg，72小時后連續(xù)三次尾靜脈測隨機血糖≥16.7mmol/L為造模成功，10只血糖不達標(biāo)，予以剔除，成模大鼠共50只，隨

3、機分為4組:模型組14只、厄貝沙坦組12只、通絡(luò)組12只、化瘀組12只。治療組分別給予相應(yīng)藥物灌胃，于16周末，收集24小時尿液，血糖試紙測大鼠隨機血糖;禁食12小時后，麻醉狀態(tài)下腹主動脈取血并分離血清，用于血生化檢測;并留取腎組織，用于光鏡、電鏡、免疫組化、PCR。
　　結(jié)果:
　　1大鼠的一般狀態(tài)
　　正常對照組大鼠一般情況良好;模型組及治療組逐漸出現(xiàn)多飲、多食、多尿癥狀，體重下降，毛色晦暗，精神萎頓，以模型組表現(xiàn)

4、最為突出，各治療組大鼠的癥狀較模型組大鼠的癥狀有所減輕。
　　2各組大鼠飲水量、進食量、尿量的比較
　　與正常對照組對比，模型組大鼠的飲水量、進食量及尿量明顯增多(P＜0.05);與模型組相比，通絡(luò)組、厄貝沙坦組飲水量明顯減少(P＜0.05)，厄貝沙坦組、通絡(luò)組的尿量明顯減少(P＜0.05);厄貝沙坦、通絡(luò)組相比，飲水量、進食量、尿量無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）;厄貝沙坦、通絡(luò)組與化瘀組對比，飲水量、進食量、尿量明顯低于后者

5、（P＜0.05）。
　　3各組大鼠體重、腎臟肥大指數(shù)（右腎重/體重）的比較
　　與空白對照組相比，模型組大鼠的體重明顯減輕（P＜0.05），腎臟肥大指數(shù)明顯升高(P＜0.05);與模型組相比，治療組的體重減輕明顯改善(P＜0.05)，腎臟肥大指數(shù)明顯改善(P＜0.05);治療組之間體重及腎臟肥大指數(shù)無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　424h尿蛋白定量
　　與正常對照組相比，模型組24h尿蛋白總量明顯升高(P＜0

6、.05);與模型組相比，治療組24h尿蛋白總量明顯降低(P＜0.05);治療組相比，厄貝沙坦組、通絡(luò)組組較化瘀組24h尿蛋白總量水平明顯降低，有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　5各組大鼠空腹血糖、膽固醇、甘油三酯的比較
　　與正常對照組相比，模型組空腹血糖、膽固醇、甘油三酯及血漿粘度明顯升高(P＜0.05);與模型組相比，通絡(luò)組、厄貝沙坦組的膽固醇和甘油三酯明顯降低(P＜0.05)，化瘀組、通絡(luò)組較厄貝沙坦組甘油三酯，膽固

7、醇明顯降低(P＜0.05)，治療組相比，通絡(luò)組的膽固醇較化瘀組明顯降低(P＜0.05)，有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　6各組大鼠血肌酐和白蛋白測定結(jié)果
　　與正常對照組相比，模型組的血肌酐顯著升高(P＜0.05);與模型組相比，各治療組血肌酐明顯降低(P＜0.05);各治療組相比，血肌酐、無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　7腎臟病理形態(tài)學(xué)觀察
　　7.1光鏡觀察
　　正常對照組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)正常;模型組大鼠腎臟腎小

8、球明顯肥大，腎小囊腔呈裂隙狀改變，腎小球基底膜彌漫性增厚，系膜基質(zhì)增生;通絡(luò)組大鼠的病理改變輕于厄貝沙坦組和化瘀組。
　　7.2電鏡結(jié)果
　　正常對照組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)正常;模型組大鼠腎臟腎小球基底膜彌漫性性增厚，足突部分融合;治療組大鼠均有類似的病理改變，與模型組相比，程度較輕;各治療組相比，通絡(luò)組的病理改變輕于厄貝沙坦組和化瘀組。
　　8免疫組化檢測腎組織CTGF的表達
　　CTGF在大鼠腎臟腎小管、腎間質(zhì)、腎

9、小球均有表達，與正常對照組相比，模型組的表達量明顯增加(P＜0.05);與模型組相比，治療組的表達量明顯降低(P＜0.05);治療組相比，化瘀組表達明顯增強(P＜0.05)。
　　9 RT-PCR檢測腎皮質(zhì)CTGF的表達
　　與正常對照組相比，模型組大鼠腎皮質(zhì)CTGF表達水平明顯高(P＜0.05);與模型組相比，治療組大鼠腎皮質(zhì)CTGF表達水平明顯低(P＜0.05);治療組相比，化瘀組高于通絡(luò)組和厄貝沙坦組，（P＜0.05）