靶向光敏性多西他賽脂質(zhì)體的研究.pdf

1、為了提高抗淺表腫瘤的治愈率及防止腫瘤的復(fù)發(fā)，本文以多西他賽(DTX)與C60丙二酸（C60）分別為抗腫瘤化學(xué)藥物和光敏劑，雙載于含C60透明質(zhì)酸（HA）的脂質(zhì)體（LP）中，以期實(shí)現(xiàn)腫瘤靶向轉(zhuǎn)運(yùn)，化療和光療的聯(lián)合，增強(qiáng)抗腫瘤效果。
　　本文采用薄膜-探超法制備C60-DTX-HA-LP脂質(zhì)體，通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)得到最優(yōu)處方，并對其進(jìn)行了表征，內(nèi)容包括形態(tài)、粒徑、PDI、電位、包封率、載藥量、體外釋放度、體外溶血實(shí)驗(yàn)及穩(wěn)定性等。

2、透射電鏡圖顯示， C60-DTX-HA-LP為類球形；平均粒徑為（158.5±1.5）nm，PDI為0.117±0.03，zeta電位為（-33.12±2.1）mV；采用超濾離心法測得DTX與C60-DMA的包封率分別為（79.37±1.51）％和（90.02±2.31）%，載藥量分別為(1.97±0.17)%和(2.23±0.14)%；透析袋法表明C60-DTX-HA-LP中DTX與C60-DMA與原料藥相比顯示出較好的緩釋效果；C6

3、0-DTX-HA-LP在4℃可穩(wěn)定靜置21天，可選用15%（w/w）的蔗糖-乳糖（1:2）作為凍干保護(hù)劑制備成凍干粉。
　　采用鼠源黑色素瘤B16-F10細(xì)胞考察了細(xì)胞攝取和細(xì)胞毒作用。采用熒光標(biāo)記法和流式細(xì)胞儀分別進(jìn)行了定性和定量攝取實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明C60-DTX-HA-LP組的細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度明顯強(qiáng)于C60-DTX-LP組，給藥后6h前者的細(xì)胞攝取率（90.8%）明顯高于后者（70.2%）。采用SRB法考察了細(xì)胞毒作用及其影響因素

4、。結(jié)果表明給藥后6h進(jìn)行光照3min會產(chǎn)生較好的細(xì)胞光療作用；給藥72h后C60-DTX-HA-LP光照組的IC50值（0.027）較DTX-HA-LP組（0.105）顯著降低3.88倍，較C60-HA-LP光照組（0.349）顯著降低12.92倍,顯示出光療和化療的聯(lián)合增強(qiáng)作用。DTX-HA-LP組IC50值（0.105）值較DTX-LP組（0.196）降低1.88倍，顯示出HA的靶向作用。
　　采用B16-F10的C57BL/

5、6小黑鼠荷瘤模型,考察了C60-DTX-HA-LP的體內(nèi)藥動學(xué)與組織分布。藥動學(xué)結(jié)果表明， C60-DTX-HA-LP組、C60-DTX-LP組與Duopafei組的MRT分別為2.121h、1.077h、0.658h，表明C60-DTX-HA-LP可明顯延長藥物在血液的滯留時間。組織分布實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相對Duopafei組，兩種脂質(zhì)體組可明顯降低藥物在心和腎中的分布，增大在肝和脾中的分布。C60-DTX-HA-LP組與其余兩組比較，能

6、明顯增加DTX在腫瘤部位的分布，顯示出靶向性。
　　采用B16-F10的C57BL/6小黑鼠荷瘤模型進(jìn)行體內(nèi)藥效學(xué)評價(jià)，監(jiān)測小鼠體重，制備腫瘤HE染色切片，并進(jìn)行小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)。結(jié)果顯示C60-DTX-HA-LP光照組的抑瘤率（93.26%）明顯高于DTX-LP組（67.42%）和C60-HA-LP光照組（26.97%），表明光療和化療的聯(lián)合抗腫瘤作用顯著高于單一機(jī)制的作用。DTX-HA-LP光照組的抑瘤率（80.90%）明