DCMTSA對創(chuàng)傷性股骨頭壞死大鼠BMP-2和BMP-7表達的影響.pdf

1、背景：
　　骨折愈合是復(fù)雜的生物學(xué)修復(fù)過程，臨床上骨折延遲愈合/不愈合的問題仍未解決，傳統(tǒng)的中西藥物干預(yù)治療時間長，效果不理想。目前，促進骨折愈合最好細(xì)胞因子是骨形態(tài)發(fā)生蛋白。實驗研究發(fā)現(xiàn)骨形成蛋白具有誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的作用。海藻酸鈉(sodiumalginate，SA)是一種從褐藻中提取的天然多糖聚合物，若能使SA部分糖醛酸單元的羥基轉(zhuǎn)變成醛基，即羧甲基海藻酸鈉(dicarboxmethyltrisodium al

2、ignate，DCMTSA)，可改善SA的生物相容性，可作為誘導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白的有效藥物。
　　目的：
　　改善SA的生物學(xué)特性，探討DCMTSA對骨形成蛋白表達的影響，明確DCMTSA對骨髓基質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化促進作用，提供一種制備方法簡單、原料來源廣泛的治療和預(yù)防骨折的藥物，為應(yīng)用于臨床預(yù)防和治療骨折等疾病提供實驗室依據(jù)。
　　方法：
　　1.制備DCMTSA: SA經(jīng)過氧化氫溶液或高錳酸鉀部分氧化，部分糖

3、醛酸單元的羥基轉(zhuǎn)變成醛基，改善SA的生物相容性。
　　2.動物模型制備及分組:45只體重(261±12)g，2～3月齡SD大鼠，制成創(chuàng)傷性股骨頭壞死模型后，以數(shù)字隨機法平均分為三組，每組15只。DCMTSA組，大鼠每日以DCMTSA0.1 g.kg-1.d-1灌胃;SA組，大鼠每日以SA0.1 g.kg-1.d-1灌胃模型組;對照組，大鼠每天0.1g.kg-1.d-1生理鹽水灌胃。
　　3.實驗方法:每組大鼠分別于術(shù)后7d、

4、14d、21d各處死5只。取大鼠骨折股骨分為兩份:一份經(jīng)10％甲醛固定后脫鈣，HE染色光鏡下觀察各組骨折處骨痂生長組織結(jié)構(gòu)，免疫組化SP法檢測骨形成蛋白-2(bone morphogenetie protein-2，BMP-2)骨形成蛋白-7(bone morphogenetie protein-7，BMP-7)的表達情況;一份脫鈣軟化后組織勻漿,以RT-PCR檢測BMP-2 mRNA和BMP-7 mRNA的表達。
　　結(jié)果：

5、r>　　1.HE染色結(jié)果:術(shù)后7d、14d、21d，DCMTSA組大鼠骨折斷端骨組織的纖維組織增生，骨小梁形成，骨基質(zhì)形成及骨結(jié)構(gòu)的形成情況明顯優(yōu)于SA組，SA組優(yōu)于對照組。
　　2.免疫組化實驗結(jié)果:術(shù)后7d、14d、21d，三組大鼠BMP-2和BMP-7蛋白表達DCMTSA組高于SA組，SA組高于對照組。
　　3.RT-PCR檢測結(jié)果:術(shù)后21d，BMP-2和BMP-7蛋白mRNA的表達DCMTSA組高于SA組，SA組高