大黃素抑制FATP1介導(dǎo)的骨骼肌脂質(zhì)沉積改善胰島素抵抗作用研究.pdf

1、目的：探討大黃素對(duì)體內(nèi)和細(xì)胞水平脂質(zhì)誘導(dǎo)的胰島素抵抗骨骼肌脂質(zhì)沉積改善作用和對(duì)骨骼肌脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)的影響，為大黃素改善胰島素抵抗作用及其可能機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1、通過(guò)高脂飼料喂養(yǎng)大鼠建立大鼠胰島素抵抗模型，大黃素干預(yù)8周，生化測(cè)定法檢測(cè)血糖、血脂，放免法測(cè)定血胰島素水平；高胰島素-葡萄糖鉗夾技術(shù)評(píng)價(jià)模型大鼠胰島素抵抗情況；油紅染色法觀察比目魚肌中脂質(zhì)沉積， ELISA方法測(cè)定比目魚肌中甘油三酯含量；Western-

2、blot和 qRT-PCR檢測(cè)比目魚肌 FATP1、FATP4、FABPpm和FAT/CD36的表達(dá)；免疫組化法觀察比目魚肌FATP1的表達(dá)。2、建立棕櫚酸誘導(dǎo)L6骨骼肌細(xì)胞胰島素抵抗模型，對(duì)其進(jìn)行棕櫚酸孵育和大黃素干預(yù)油紅染色觀察L6細(xì)胞中脂質(zhì)沉積，ELISA法測(cè)定細(xì)胞中棕櫚酸和甘油三酯水平;Western-blot和qRT-PCR分別檢測(cè)L6細(xì)胞FATP1、FATP4、FABPpm和FAT/CD36表達(dá)，，同時(shí)免疫組化法觀察FATP

3、1 L6細(xì)胞中的表達(dá)。
　　結(jié)果：1、高脂喂養(yǎng)的大鼠胰島素抵抗模型結(jié)果顯示，大黃素組血糖、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白和胰島素水平比高脂模型組顯著降低，但體重沒(méi)有顯著減輕；胰島素抵抗指數(shù)明顯下降和葡萄糖輸注率顯著提高。骨骼肌油紅染色和甘油三酯水平顯示，大黃素組染色的脂滴數(shù)量和甘油三酯水平明顯減少；骨骼肌脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)檢測(cè)顯示，大黃素組大鼠骨骼肌中FATP1的蛋白和基因表達(dá)比模型組明顯降低，而FATP4、FAT/CD36和F

4、ABPpm表達(dá)沒(méi)有明顯變化，同時(shí)免疫組化結(jié)果也發(fā)現(xiàn)大黃素組骨骼肌FATP1表達(dá)比模型組減少。2、棕櫚酸誘導(dǎo)的骨骼肌細(xì)胞胰島素抵抗模型結(jié)果顯示，大黃素組骨骼肌細(xì)胞內(nèi)的脂滴數(shù)量和棕櫚酸水平明顯減少， FATP1的蛋白和基因表達(dá)明顯降低，而FATP4、FAT/CD36和FABPpm表達(dá)沒(méi)有明顯變化，免疫組化結(jié)果同樣顯示骨骼肌細(xì)胞內(nèi)FATP1表達(dá)減少。
　　結(jié)論：大黃素可減輕體內(nèi)外脂質(zhì)誘導(dǎo)的胰島素抵抗骨骼肌脂質(zhì)沉積，從而改善胰島素抵抗作用