內質網(wǎng)應激介導高脂及棕櫚酸致骨骼肌胰島素抵抗及非諾貝特的干預機制初探.pdf

1、目的：
　　觀察高脂飲食（high-fat diet，HFD）對雌性SD大鼠骨骼肌的影響，探討非諾貝特（fenofibrate，F(xiàn)F）對高脂及棕櫚酸導致的骨骼肌胰島素抵抗的保護作用是否與內質網(wǎng)應激（endoplasmic reticulum stress，ERS）有關。
　　方法：
　　雌性SD大鼠隨機分為三組：標準飲食組（standard control diet,SCD）、高脂飲食組（HFD）及治療組（HFD+FF

2、）。高脂組和治療組大鼠先予以高脂飲食20wk后，高脂組大鼠繼續(xù)予以高脂飲食8wk，治療組大鼠予以非諾貝特（30mg·kg-1·d-1）灌胃治療8wk。每周監(jiān)測大鼠體重，第28周檢測血清生化指標TC、TG、LDL-C、HDL-C，葡萄糖耐量試驗（GTT）和胰島素耐量試驗（ITT）測定胰島素抵抗(IR)，Real-time RT-PCR測定骨骼肌組織葡萄糖調節(jié)蛋白78（GRP78）、轉錄因子GADD153（CHOP）、肌醇酶1α（IRE1α

3、）、真核起始因2的α亞基（eIF2α）和過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）基因表達，Western-blot法檢測骨骼肌組織GRP78蛋白的表達水平。將骨骼肌細胞C2C12分組：正常對照組（normal control group,NC）、模型組（棕櫚酸組，palmitic acid,PA）、陽性對照藥組（衣霉素組，tunicamycin,TM）、治療組（棕櫚酸+非諾貝特酸，PA+FA），RT-PCR測定GRP78、CHOP、I

4、RE1α和eIF2αmRNA的表達水平，Western-blot檢測GRP78、Akt和p-Akt蛋白表達水平，免疫熒光檢測CHOP蛋白表達水平。
　　結果：
　　（1）GTT實驗提示HFD組大鼠給予葡萄糖30 min后血糖值達高峰，且較SCD組、HFD+FF組血糖峰值升高，此后緩慢下降；與HFD組大鼠相比，HFD+FF組大鼠空腹血糖降低，給予葡萄糖后30 min時峰值降低，血糖波動較小。ITT實驗顯示大鼠注射胰島素后，SC

5、D組血糖迅速下降，30 min時達最低值后血糖緩慢上升；HFD組血糖緩慢下降，且始終維持在較高水平，90 min時達最低值后血糖緩慢上升；HFD+FF組大鼠各點血糖值介于HCD和SCD組之間，注射胰島素后血糖下降至60 min時達最低值，隨后緩慢上升。
　?。?）與SCD組大鼠相比，HFD組大鼠體重顯著增加（P<0.05），血清TG、TC水平明顯升高，HDL-C水平顯著下降（P<0.05）；與HFD組大鼠相比，非諾貝特干預后能夠顯

6、著減少大鼠體重、改善肥胖，降低血清TC、TG水平，增加血清HDL-C水平（P<0.05）。
　?。?）與SCD組大鼠相比，HFD組大鼠GRP78、CHOP、IRE1α和eIF2α基因表達水平均明顯上調，與HFD組大鼠相比，非諾貝特治療后PPARα表達水平明顯增加，GRP78、CHOP、IRE1α和eIF2α基因表達水平下調；
　　（4）與NC組相比，PA組骨骼肌細胞GRP78、CHOP、IRE1α和eIF2α基因表達水平顯著