生長追趕IUGR大鼠骨骼肌組織胰島素抵抗的機制研究.pdf

1、目的：流行病學(xué)顯示，宮內(nèi)發(fā)育遲緩兒（I ntrauterine growth retardation，IUGR）成年后易出現(xiàn)肥胖、胰島素、抵抗高血壓、2 型糖尿病及脂代謝紊亂，并稱代謝綜合征。代謝綜合征的中心環(huán)節(jié)是胰島素抵抗。IUGR 生后早期出現(xiàn)的生長追趕可能與其發(fā)生胰島素抵抗危險性增加有關(guān)。本實驗旨在研究追趕生長對IUGR大鼠骨骼肌胰島素信號途徑相關(guān)分子的影響。
　　 方法：采用母孕期饑餓法建立IUGR 新生大鼠模型。受孕母

2、鼠隨機分為正常對照組和實驗組，實驗組懷孕母鼠全程限制飼料，約7.5g/d,為正常孕鼠三分之一的飼料，飲水不限制。生產(chǎn)當(dāng)天及產(chǎn)后均給予充足的食物。限食母鼠每只一籠喂哺5 只新生幼鼠建立追趕生長IUGR組（catch-up growth IUGR，IUGR-CG）模型，正常母鼠隨即保留8 只新生幼鼠喂哺作為對照組（appropriate for gestational age,AGA）。出生1周后隨機挑選10 只不同窩別的IUGR組新生幼鼠

3、(雌雄各半)和相同數(shù)量的對照組新生幼鼠（雌雄各半）處死并立即提取股四頭肌組織放于-70 ℃冰箱保存。待喂養(yǎng)幼鼠至3周時停止喂哺，分離母鼠幼鼠，自由進食水。分別隨機取生后第3、5、7周各個時間點IUGR組和AGA組大鼠10 只（雌雄各半），處死動物提取股四頭肌組織。將至1周開始的所有組織提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后進行Real-Time PCR 檢測IRS-1，IRS-2，SOCS-1,SOCS-2,SOCS-3和Pi3k的mRNA的

4、表達水平。為了排除RNA 起始濃度對擴增效率的影響，所有因子mRNA的表達水平通過相對表達量表示。免疫組化法測定SOCS-2蛋白在股四頭肌組織中的表達。
　　 結(jié)果：骨骼肌組織熒光實時定量PCR 檢測結(jié)果顯示：出生1、3周IUGR大鼠骨骼肌IRS-1 mRNA 相對表達水平與正常對照組沒有差異（p值分別為0.072，0.054）。5、7周齡IUGR大鼠骨骼肌IRS-1 mRNA 相對表達水平均低于正常對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（p

5、值分別為0.000，0.018）。出生1周IUGR大鼠骨骼肌IRS-2 mRNA 相對表達水平高于正常對照組（p=0.000）。3，5,7周齡IUGR大鼠骨骼肌IRS-2 mRNA 相對表達水平均低于正常對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（p值分別為0.037，0.000，0.024）。出生1、3、5、7周齡IUGR大鼠骨骼肌SOCS-1 mRNA 相對表達水平均高于正常對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（p值分別為0.014，0.000，0.000，0.

6、000）。出生1周IUGR大鼠骨骼肌SOCS-2mRNA 相對表達水平與正常對照組相比沒有差別（p=0.002）。3、5周齡IUGR大鼠骨骼肌SOCS-2 mRNA 相對表達水平均高于正常對照組（p值分別為0.000，0.045）。7周齡IUGR大鼠骨骼肌SOCS-2 mRNA 相對表達水平和正常對照組沒有差異（p=0.059）。出生1、3、7周IUGR大鼠骨骼肌SOCS-3 mRNA 相對表達水平均高于正常對照組（p值分別為0.000

7、，0.025，0.000）。5周齡IUGR大鼠骨骼肌SOCS-3mRNA 相對表達水平與正常對照組相比沒有統(tǒng)計學(xué)差異（p=0.025）。出生1、3、5、7周IUGR大鼠骨骼肌PI3KmRNA相對表達水平均低于正常對照組（p值分別為0.034，0.019，0.026，0.000）。免疫組化染色：IUGR組1,3，5,7周齡大鼠骨骼肌組織SOCS-2蛋白表達水平與實時定量結(jié)果一致。
　　 結(jié)論：宮內(nèi)營養(yǎng)不良可影響IUGR 骨骼肌組織