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文檔簡介
1、TEV蛋白酶（tobacco etch virus protease）是煙草蝕斑病毒編碼的NIa蛋白中27 KD的催化區(qū)域。由于它能特異性識別含有6個氨基酸(ENLYFQ)特定序列的蛋白，并進行酶切，酶切活性較高，且酶切的條件具有寬容性。因此在重組蛋白領域中應用廣泛。
本實驗室依據(jù)大腸桿菌偏愛密碼子和TEV的基因序列，通過重疊PCR的方法成功克隆了TEV基因。目前對TEV酶的研究主要集中在通過不同的方法提高TEV酶的表達量、精
2、確的活性分析以及對TEV酶進行固定化，其中對于TEV酶的活性檢測大部分是通過半定量進行分析，即通過酶切后蛋白的SDS-PAGE上條帶的大小和結合蛋白濃度分析軟件進行分析。
本實驗通過構建 pET28b-MBP-his-TEV、 pET28b-MBP-his-ACP-TEV、pET28b-MBP-ybbR-his-TEV重組載體，成功表達和純化出目的蛋白，并且通過酶活分析發(fā)現(xiàn)ACP蛋白和ybbR短肽對TEV酶的活性有促進作用，其
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