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1、β-淀粉酶(EC3.2.1.2)廣泛存在于各種高等植物和微生物中,它能夠作用于多糖的非還原性末端,順次切割相隔的α-1,4糖苷鍵,生成β-旋光的麥芽糖。耐熱淀粉酶在食品及飲料工業(yè)中具有很重要的應(yīng)用價(jià)值,因?yàn)樘岣叻磻?yīng)溫度不僅可以增加淀粉的可溶性,而且可以防止雜菌的生長,這對于降低生產(chǎn)成本是十分有利的。 本實(shí)驗(yàn)對184份核心種質(zhì)大豆的酶活力和熱穩(wěn)定性進(jìn)行了測定。篩選得到的熱穩(wěn)定性最佳的6種酶均具有較寬的作用溫度和作用pH,其中5種酶的半
2、衰期(63℃、pH5.0)超過5h,表明這些大豆β-淀粉酶具有較好的酶學(xué)特性,極具工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。 以篩選得到的大豆總RNA為模板,通過RT-PCR得到大豆?jié)?9-2492和中黃20的β-淀粉酶基因的cDNA序列(1.5kb),測序結(jié)果表明該序列編碼496個(gè)氨基酸。構(gòu)建表達(dá)載體pBMY,并在大腸桿菌中將濟(jì)99-2492的β-淀粉酶cDNA進(jìn)行融合表達(dá),重組酶的分子量大小為50kD,在30℃誘導(dǎo),胞內(nèi)酶活力可達(dá)19.61U/mL。活性染
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