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文檔簡介
1、目的:孕酮和雌激素對妊娠的維持至關(guān)重要。在人類胎盤中,孕酮和雌激素的產(chǎn)生主要由3β-羥基類固醇脫氫酶1(3β-hydroxysteroid dehydrogenase1,HSD3B1)和芳香酶(cytochrome aromatase,CYP19A1)催化而來。孕烯醇酮(pregnenolone,PREG)在HSD3B1的催化下,形成孕酮(progesterone,P4)。雄激素在芳香酶CYP19A1及輔助因子NADPH共同作用下催化為
2、雌激素。而這兩個酶的活性會受到環(huán)境雌激素的影響。本研究中,我們將對兩個環(huán)境雌激素己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)和雙酚A(bisphenol A,BPA)對人類胎盤中HSD3B1和CYP19A1酶活性的影響進行探究。
方法:HSD3B1蛋白由人HSD3B1基因轉(zhuǎn)錄而來,通過對COS1細胞中HSD3B1的測定從而確定HSD3B1活性的抑制程度。通過對JEG-3微粒體蛋白中CYP19A1的測定,從而確定CY
3、P19A1活性的抑制程度。
結(jié)果:當己烯雌酚和雙酚A加入JEG-3細胞培養(yǎng)24小時,己烯雌酚能夠高度抑制孕酮的產(chǎn)生,雙酚A能夠中度的抑制孕酮的產(chǎn)生。己烯雌酚和雙酚A都能中度抑制脫氫表雄酮介導的雌二醇的產(chǎn)生。己烯雌酚對HSD3B1的半數(shù)抑制濃度(IC50)為1.17±0.095μM。當加入底物孕烯醇酮后,己烯雌酚作為競爭性抑制劑。當加入輔助因子NAD+,己烯雌酚作為混合型抑制劑。己烯雌酚和雙酚A能中度抑制人胎盤CYP19A1,I
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