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文檔簡介
1、目的:近年來,隨著經(jīng)濟的發(fā)展和社會進步,環(huán)境的污染越來越嚴(yán)重,而環(huán)境的破壞也直接或間接導(dǎo)致了男性生殖能力的下降,男性生殖能力下降的主要表現(xiàn)是內(nèi)在或外在因素對睪丸和精子的影響。男性生育能力的降低己直接影響到人類未來的發(fā)展,導(dǎo)致這種結(jié)果的因素是多種多樣的,而環(huán)境激素對生殖的危害越來越受到男科醫(yī)生的重視。BPA是環(huán)境激素的一種,具有雌激素樣活性,是目前國內(nèi)外研究的焦點,但是,對于BPA的生殖毒性,國內(nèi)外學(xué)者的研究還比較少。目前對BPA生殖毒性
2、的研究主要集中在睪丸生殖細(xì)胞在形態(tài)學(xué)方面的變化,有學(xué)者通過研究BPA染毒的孕鼠或幼鼠發(fā)現(xiàn)其對睪丸內(nèi)生殖細(xì)胞形態(tài)和精子的產(chǎn)生有影響,也有研究表明環(huán)境激素可以導(dǎo)致雄性生殖系統(tǒng)發(fā)育異常。本實驗利用雙酚A(BPA)染毒大鼠模型觀察不同劑量的BPA對雄性睪丸內(nèi)生精細(xì)胞的損傷及端粒酶、端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)表達的影響,探討B(tài)PA生殖毒性的可能作用機制。
方法:選擇符合試驗標(biāo)準(zhǔn)的健康雄性SD
3、大鼠48只,將其隨機分為4組:對照組及染毒低劑量組、中劑量組、高劑量組。染毒方法:將BPA溶于食用玉米油,配置成2、20、200mg/(kg*d)3種濃度,灌胃體積為1ml/d,每天上午8時灌胃,對照組給予同體積的食用玉米油,連續(xù)灌胃8周,計算睪丸臟器系數(shù),取附睪作精子密度、活動率及畸形率測定,免疫組化方法檢測大鼠生精細(xì)胞TERT活性的表達;用硝酸還原酶法檢測睪丸組織NO的含量;化學(xué)比色法檢測睪丸組織NOS的活性。應(yīng)用SPSS13.1統(tǒng)
4、計軟件,采用單因素方差分析(one-way ANOVA)方法,組間比較選用LSD法:采用直線相關(guān)分析描述兩變量之間的關(guān)系數(shù)。檢驗標(biāo)準(zhǔn):α=0.05,P<0.05有統(tǒng)計學(xué)差異。
結(jié)果:大鼠睪丸組織病理學(xué)觀察:經(jīng)BPA染毒的低劑量組與對照組相比變化不大;中、高劑量組生精小管排列較松散,管腔中生精細(xì)胞排列紊亂、疏松,細(xì)胞體積略有縮小;睪丸間質(zhì)可見不同程度水腫,間質(zhì)細(xì)胞分布稀疏。大鼠體重及睪丸、附睪臟器重量及睪丸臟器系數(shù)檢測:隨著
5、BPA染毒劑量的增加,大鼠體重、右睪丸和右附睪的重量逐漸降低,染毒中、高劑量組與對照組相比上述指標(biāo)均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且大鼠體重、右睪丸及右附睪與BPA染毒劑量呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.844,p<0.001;r=-0.903,p<0.001;r=-0.605,p<0.001);精子質(zhì)量分析:大鼠的精子密度、活率隨染毒劑量的增加而逐漸降低,中、高劑量組與對照組相比降低明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);大鼠精子總畸形率也明顯
6、增高,與對照組比較低劑量組增高不明顯(P>0.05);中、高劑量組與對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0O.05)。生精細(xì)胞TERT表達檢測:TERT陽性產(chǎn)物在各劑量組的生精細(xì)胞中均有表達,與對照組相比均有不同程度的降低,低劑量組表達無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),中、高劑量組與對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且TERT陽性產(chǎn)物表達與BPA染毒劑量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.885,p<0.001),各劑量組TERT的表達與精子密度呈正相關(guān)性
7、(r=0.831,p<0.001)。生精細(xì)胞NO、NOS的表達檢測:大鼠睪丸組織中NO的含量以及NOS活性在各劑量組均有不同程度升高,BPA染毒低劑量組與對照組相比升高不明顯,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而染毒中、高劑量組與對照組相比升高明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:一定劑量的BPA可通過抑制生精細(xì)胞TERT表達來降低端粒酶活性,促進生精細(xì)胞的損傷,使睪丸精子生成減少;BPA促使NOS活性的增強使N
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