游離泛素(free UB)對輻射損傷的防護作用及機制研究.pdf

1、一、電離輻射對體內(nèi)free UB的表達水平的影響
　　【目的】：研究電離輻射誘導機體體內(nèi)free UB的表達變化。
　　【方法】：應(yīng)用ELISA法定量檢測X射線照射后C57小鼠血清中free UB的含量，γ射線照射后恒河猴血清中free UB的含量，食管癌病人放療前、放療中、放療后血清中free UB的含量變化；Western blot法檢測小鼠不同輻射敏感組織中free UB蛋白的表達；RT-PCR法檢測小鼠不同輻射敏感組

2、織中free UB編碼基因UBB的mRNA水平。
　　【結(jié)果】：與非照射組相比，照射后24、48 h，小鼠血清中free UB濃度隨照射劑量的增加而增加（P<0.01）；5、10 Gy X射線照射后，小鼠血清中free UB濃度隨照射后時間的延長而增加（P<0.01)。與非照射組相比，恒河猴血清中free UB濃度在照射后1、3、7、15 d明顯增加（P<0.05)，照射后21 d恢復正常值。與放療前相比，腫瘤病人放療中血清中fr

3、ee UB的表達量無明顯變化（P>0.05），然而，放療后血清中free UB的表達量明顯增加（P<0.05）。與照射前相比，7 Gy X射線照射后1、7 d，小鼠小腸組織中free UB表達量明顯增加（P<0.05）；7 Gy X射線照射后1、7、14 d，小鼠脾臟組織中free UB表達量明顯增加（P<0.05）；然而，7 Gy X射線照射后1、7、14d，小鼠心臟、肝臟、肺臟、腎臟組織中free UB表達量無明顯變化。與非照射組相

4、比，X射線照射后24 h，free UB編碼基因UBB的mRNA表達水平均明顯增加（P<0.01）；而心臟組織中free UB編碼基因UBB的mRNA表達水平均無明顯改變（P>0.05）。
　　【結(jié)論】：通過誘導輻射敏感組織中free UB蛋白表達水平增加，電離輻射能夠增加機體血清中free UB的表達量；free UB水平可能與組織的輻射敏感性和組織受損程度有關(guān)。
　　二、Free UB對小鼠輻射損傷的防護作用
　　

5、【目的】：探討free UB對小鼠輻射損傷的防護功效。
　　【方法】：觀察記錄5、7、9 Gy全身照射后 free UB預(yù)處理組C57BL/6小鼠及PBS預(yù)處理組小鼠的生存，繪制生存曲線。通過連續(xù)觀察free UB對X射線輻射后小鼠白細胞、紅細胞、血紅蛋白、血小板的影響，胸骨骨髓病理形態(tài)學的影響，以及free UB對X射線照射后小鼠骨髓CFU-GM的影響，探討free UB對造血系統(tǒng)的輻射防護作用。通過觀察free UB對X射線照

6、射后小鼠腸道一般情況的影響，小腸病理形態(tài)學的影響，以及Ki-67+小腸隱窩細胞數(shù)的影響，探討free UB對腸道系統(tǒng)的輻射防護作用。通過觀察free UB對X射線輻射后小鼠脾臟病理形態(tài)學的影響，探討free UB對免疫系統(tǒng)的輻射防護作用。
　　【結(jié)果】：Free UB提高了5、7、9 Gy X射線照射后小鼠的存活率。Free UB促進了外周血白細胞、紅細胞、血紅蛋白、血小板的恢復，減輕了胸骨骨髓組織的輻射損傷，減輕了輻射對造血祖細

7、胞（HPC）的功能抑制，對造血系統(tǒng)的輻射損傷具有保護作用。Free UB減輕了輻射后小鼠腹腔內(nèi)腸道的水腫程度，減輕了輻射后小鼠空腸絨毛、隱窩的損傷，提高了Ki-67+小腸隱窩細胞數(shù)目，對腸道系統(tǒng)的輻射損傷具有保護作用。Free UB減輕了輻射后小鼠脾臟淋巴細胞的損傷，對免疫系統(tǒng)的輻射損傷具有保護作用。
　　【結(jié)論】：Free UB對小鼠的造血系統(tǒng)、腸道系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)具有輻射防護作用。
　　三、Free UB對小鼠輻射損傷防護

8、作用的機制研究
　　【目的】：探討free UB對小鼠輻射損傷防護作用的機制研究。
　　【方法】：運用小鼠全基因表達譜芯片觀察free UB對輻射小鼠小腸基因表達譜的影響，運用免疫組化以及Western Blot法觀察 free UB對輻射后小鼠小腸組織中YAP、Akt、p-Akt表達量的影響，初步闡明free UB對輻射損傷防護作用的分子機理。
　　【結(jié)果】：表達譜芯片表明free UB可影響多個受體介導的信號通路，