促甲狀腺激素(TSH)對(duì)裸鼠甲狀腺乳頭狀癌組織的影響及意義.pdf

1、目的：甲狀腺乳頭狀癌術(shù)后患者長(zhǎng)期服用超生理需要量的甲狀腺素會(huì)產(chǎn)生主要針對(duì)心血管和骨骼的不良影響。長(zhǎng)期促甲狀腺激素抑制會(huì)使患者心率加快，頻發(fā)的房性期前收縮。而絕經(jīng)后婦女促甲狀腺激素≤0.03mU/L，骨質(zhì)疏松導(dǎo)致骨折的風(fēng)險(xiǎn)增加2倍。甲狀腺乳頭狀癌中約有10％的患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)，其中只有一小部分會(huì)因復(fù)發(fā)而死亡，甲狀腺乳頭狀癌患者的促甲狀腺激素水平到底應(yīng)該抑制到多少能夠使患者受益還尚未有明確的研究可以說(shuō)明。本研究旨在探討不同濃度的促甲狀腺激素對(duì)甲

2、狀腺乳頭狀癌生長(zhǎng)的作用，為促甲狀腺激素抑制的臨床用藥提供理論依據(jù)。
　　方法：35只體重在7～9克直間的雄性BALB/c-nu/nu裸小鼠按照完全隨機(jī)化原則分為7組。取人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞系TPC-1，以1×106細(xì)胞數(shù)制成100ul細(xì)胞懸液接種于35只裸小鼠皮下，并分別給予不同濃度的TSH：對(duì)照組(0mU/L)、2mU/L、4mU/L、8mU/L、12mU/L、16mU/L、20mU/L。觀察并測(cè)量各組瘤體大小，并用放射免疫分析

3、法測(cè)定瘤體組織勻漿中甲狀腺球蛋白(TG)的含量。
　　結(jié)果：
　　1、甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞的培養(yǎng)
　　將培養(yǎng)瓶放于37℃，5%濃度的CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。4-5d后，大量細(xì)胞貼壁。進(jìn)入甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞的潛伏期，期間細(xì)胞的偽足進(jìn)一步伸長(zhǎng)，細(xì)胞呈多角形，細(xì)胞核及細(xì)胞體積逐漸增大。5-7d后，細(xì)胞進(jìn)入生長(zhǎng)較快增殖期，細(xì)胞繼續(xù)伸長(zhǎng)且向四周生長(zhǎng)，彼此連接，呈長(zhǎng)梭形，幾乎無(wú)圓形及橢圓形細(xì)胞，已貼滿培養(yǎng)瓶底一半以上。7-8d后，于培

4、養(yǎng)瓶中形成單層細(xì)胞。每天定時(shí)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，細(xì)胞生長(zhǎng)密度大于90%，進(jìn)行細(xì)胞的傳代。在顯微鏡下計(jì)數(shù)并記錄，然后制備成細(xì)胞懸液，每只小鼠注射細(xì)胞數(shù)為1×106個(gè)。
　　2、不同濃度的TSH組裸小鼠的生長(zhǎng)狀況
　　TPC-1細(xì)胞頸背部皮下注射接種35只雄性BALB/c-nu/nu裸小鼠，16天后均成瘤。所有裸小鼠均成活。移植瘤生長(zhǎng)情況良好，35只裸小鼠在16天內(nèi)生長(zhǎng)狀態(tài)良好，活動(dòng)量與進(jìn)食飲水量無(wú)明顯異常。
　　3、不同濃

5、度TSH組裸鼠瘤體體積大小的比較
　　運(yùn)用公式(體積=長(zhǎng)×寬×寬÷2)計(jì)算出腫瘤的體積(單位：mm3)，計(jì)量資料采用方差分析，最終結(jié)果用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示：1組：97.00±25.25、2組：209.70±96.91、3組：520.81±184.86、4組：1398.98±97.24、5組：2196.81±162.39、6組：2764.33±228.29、7組：3024.00±199.87。通過(guò)統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0，根據(jù)測(cè)定

6、數(shù)據(jù)，P<0.05，說(shuō)明各組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。體積呈增大趨勢(shì)。計(jì)算多個(gè)樣本均數(shù)間的多重比較采用SNK-q檢驗(yàn)，1組和2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，繪制折線圖。測(cè)體積與 TSH濃度分組的Pearson相關(guān)性R2=0.973，相關(guān)性良好且呈正相關(guān)。
　　4、不同濃度TSH組裸鼠瘤體組織勻漿甲狀腺球蛋白濃度含量的比較
　　經(jīng)蛋白校正后，最終結(jié)果用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，測(cè)出各組甲狀腺球蛋白(TG)濃度含量(單位：ng/mgpro)：1組：1

7、.50±0.01、2組：1.50±0.02、3組：1.68±0.11、4組：1.91±0.10、5組：2.02±0.03、6組：2.15±0.05、7組：2.26±0.13.通過(guò)統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0，計(jì)量資料采用方差分析，計(jì)算多個(gè)樣本的F檢驗(yàn)，P<0.05，說(shuō)明各組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TG呈增高趨勢(shì)。計(jì)算多個(gè)樣本均數(shù)間的多重比較采用SNK-q檢驗(yàn)，1組和2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，繪制折線圖。測(cè)TG與TSH濃度分組的Pearson相關(guān)性R2

8、=0.956，相關(guān)性良好且呈正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1、TSH可以提高構(gòu)建甲狀腺乳頭狀癌裸鼠模型的成功率。
　　2、TSH對(duì)皮下接種甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞(TPC-1系)裸鼠的成瘤具有促進(jìn)作用，隨著TSH濃度的增加，腫瘤體積呈增大趨勢(shì)。
　　3、TSH對(duì)皮下接種甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞(TPC-1系)裸鼠的甲狀腺球蛋白(TG)的分泌具有促進(jìn)作用，隨著TSH濃度的增加，TG濃度含量呈增高趨勢(shì)。
　　4、TG的濃度含量