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文檔簡介
1、目的:
初步研究丹參酮II-A(TsII-A)體外對大鼠成骨細胞增殖分化及BMP-2、TGF-β1mRNA表達的影響,探討TsII-A對成骨細胞可能存在的作用機制,為TsII-A應(yīng)用于臨床上研究正畸牙移動提供實驗基礎(chǔ)。
方法:
分離、培養(yǎng)、純化SD大鼠乳鼠顱蓋骨成骨細胞,選擇傳代至第3代成骨細胞進行細胞形態(tài)學(xué)鑒定;第3代成骨細胞分為實驗組及對照組,實驗組給予5×10-3 mg/L、5×10-2 mg/L、5
2、×10-1 mg/L TsII-A處理,對照組加入與實驗組等量的完全培養(yǎng)基DMEM;于接種后第1、3、5、7天4個時間點,觀察TsII-A對成骨細胞增殖的影響,并采用RT-qPCR檢測TsII-A對成骨細胞BMP-2、TGF-β1mRNA表達的影響;在第5天檢測成骨細胞中堿性磷酸酶(ALP)活性。
結(jié)果:
培養(yǎng)所得的細胞于倒置相差顯微鏡下觀察,細胞形態(tài)符合成骨細胞形態(tài)學(xué)特征,經(jīng)過ALP、茜素紅染色,結(jié)果符合成骨細胞生
3、物學(xué)特性;Cell Counting Kit-8(CCK-8)法檢測結(jié)果顯示,各實驗組測定OD值均大于對照組,其中以5×10-2 mg/L濃度組O D值最大;實驗組中ALP活性高于對照組(P<0.05);在各檢測時間點,成骨細胞BMP-2、TGF-β1mRNA表達量實驗組均高于對照組(P<0.05),各實驗組組內(nèi)比較,BMP-2、TGF-β1mRNA表達量隨時間推移均呈現(xiàn)上升趨勢,即第7天>第5天>第3天>第1天,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P
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