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文檔簡介
1、丹參素是一種重要的天然酚酸類化合物,在醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域具有廣泛的應用前景。目前丹參素主要來源于中藥丹參的根部,由于提取難度大和含量低制約了丹參素的應用。發(fā)酵生產(chǎn)丹參素是一個重要的研究方向,本文研建組成型合成丹參素的大腸桿菌,并從發(fā)酵液中分離丹參素。
本文選用7種不同強度的lacUV5、trc、tac、gap、gaptb、p342和p46啟動子來調(diào)控hpaBC和dldh兩個基因的表達,通過重疊延伸PCR和酶切連接技術(shù)構(gòu)建了13種
2、組合。利用λ-red同源重組將13種組合整合到BKT5的染色體上,得到13株重組大腸桿菌。搖瓶發(fā)酵結(jié)果表明,菌株BCL13的丹參素產(chǎn)量最高,達到618mg/L,BCL2的丹參素產(chǎn)量最低,僅僅為45mg/L。更改兩個基因的啟動子,丹參素的產(chǎn)量變化了13倍。
通過對發(fā)酵液中丹參素的靜態(tài)和動態(tài)的吸附與解吸實驗,得到了最佳的吸附和解吸條件以及最合適的大孔吸附樹脂類型,并且用動力學吸附曲線和等溫吸附曲線來描述樹脂對丹參素的吸附行為。最佳
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