2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、目的：大鼠內(nèi)皮抑素基因克隆并在大腸桿菌中表達(dá)。 方法：以大鼠腦組織總RNA為模板，采用RT-PCR法從中擴(kuò)增內(nèi)皮抑素基因，并將獲得基因重組入pThiohis表達(dá)載體，重組子經(jīng)雙酶切、PCR及測(cè)序鑒定。利用已成功轉(zhuǎn)化的pthiohis-Endo融合表達(dá)重組子的大腸桿菌TOP10，在IPTG誘導(dǎo)下表達(dá)融合蛋白，親和層析方法純化，純化產(chǎn)物EK酶酶切后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳及Westem-blot鑒定，MTT法鑒定其對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮

2、細(xì)胞增殖的影響。 結(jié)果： 從大鼠腦組織中成功擴(kuò)增內(nèi)皮抑素的cDNA片斷，并將其克隆入pThiohis載體，經(jīng)雙酶切、PCR及測(cè)序鑒定，產(chǎn)物大小及基因序列與預(yù)期值相符。經(jīng)過親和層析方法純化的內(nèi)皮抑素融合蛋白行EK酶酶切后經(jīng)聚丙烯酰胺電泳和Westem-blot鑒定與預(yù)期相符，并能抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖。 結(jié)論： 成功克隆大鼠內(nèi)皮抑素基因并在大腸桿菌中表達(dá)，獲得具有生物學(xué)活性的內(nèi)皮抑素融合蛋白，為今后自主開

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