沙棘葉中主要黃酮類成分的提取富集工藝研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)采用綠色新型的提取溶劑-低共熔溶劑對沙棘葉中五種主要黃酮類成分蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚和異鼠李素進(jìn)行高效快速提取，研究了低共熔溶劑微波輔助提取工藝，并對工藝參數(shù)進(jìn)行系統(tǒng)優(yōu)化，同時結(jié)合大孔吸附樹脂對提取液中的黃酮類成分進(jìn)行分離富集，并對富集物進(jìn)行了系統(tǒng)的抗氧化活性評估。本論文建立了一套高效、快速、準(zhǔn)確檢測沙棘葉中活性成分的分析檢測方法和提取富集分離工藝，為合理開發(fā)和高效利用沙棘資源提供了必要的科學(xué)依據(jù)。具體研究

2、結(jié)果如下:
　　1.建立了高效液相色譜同時分析檢測沙棘葉中蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚和異鼠李素的方法:
　　色譜柱:KYA HIQ sil C18W column(250 mm×4.6 mm i.d.，5μm);流動相:乙腈(A)-0.4％磷酸水溶液(B);流速:1 mL/min;柱溫:30C;檢測波長:254 nm和370nm;進(jìn)樣量:5μL。梯度洗脫條件:0-7 min，10-15％(A);7-10

3、min，15-17％(A);10-25 min,17-17％(A);25-27 min,17-18％(A);27-31 min,18-19％(A);31-34 min,19-19％(A);34-38 min,19-26％(A);38-42 min,26-26％(A);42-55 min,26-50％(A);55-60 min，50-10％(A)。
　　2.對微波輔助低共熔溶劑提取沙棘葉中蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈

4、酚和異鼠李素的條件進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)設(shè)計和工藝優(yōu)化，確定了最優(yōu)微波輔助低共熔溶劑提取的工藝參數(shù):
　　低共熔溶劑:氯化膽堿/1，4-丁二醇=1/3（摩爾比，含水量為20％）
　　提取溫度:64C
　　提取時間:18 min
　　液固比:20∶1 mL/g
　　在上述優(yōu)化的條件下對沙棘葉進(jìn)行提取，蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚、異鼠李素的平均提取率分別為8.967 mg/g、1.809 mg/g、9.

5、107 mg/g、0.448mg/g、0.489 mg/g，提取效果優(yōu)于低共熔溶劑超聲輔助提取和低共熔溶劑熱回流輔助提取。
　　3.利用大孔吸附樹脂對沙棘葉低共熔溶劑提取液進(jìn)行富集分離，并對富集物的抗氧化活性進(jìn)行了評價:
　　利用HPD-826，DM-130，D-3520，NKA-9，AB-8和D101六種型號的大孔吸附樹脂直接富集分離低共熔溶劑提取液中的黃酮成分，其中AB-8型號樹脂總體回收率最高，經(jīng)AB-8型號大孔吸附樹

6、脂處理后，蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚和異鼠李素五種黃酮類成分的回收率分別為83.59％、74.46％、84.99％、72.36％和77.85％。此外，在沙棘葉提取物的抗氧化活性的研究中，經(jīng)AB-8型號樹脂富集出的提取物的抗氧化能力最強(qiáng)，在DPPH自由基清除能力實(shí)驗(yàn)中，測定抗氧化能力的IC50值為0.074 mg/mL;在ABTS自由基清除能力實(shí)驗(yàn)中，抗氧化能力的的測定值為0.662mmol/g Trolox;在還原力