維甲酸受體α和類視黃醇X受體α在潰瘍性結(jié)腸炎患者和小鼠結(jié)腸炎模型中的表達(dá)及其在炎癥中的作用.pdf

1、目的：探討維甲酸受體α（RAR-α）及類視黃醇X受體α（RXR-α）在小鼠結(jié)腸炎模型及潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis,UC）患者腸道組織中的表達(dá)，并進(jìn)一步研究全反式維甲酸緩解小鼠腸道炎癥的作用機(jī)制。
　　方法：選取UC患者及健康對(duì)照者的腸道活檢組織各18例，用于RT-PCR及Western blot檢測(cè)RAR-α、RXR-α的表達(dá)。建立小鼠葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium, DSS）結(jié)

2、腸炎的急性模型，并給予全反式維甲酸（all-trans inoid acid, ATRA）干預(yù)：將小鼠隨機(jī)分成4組（每組有8只）：空白對(duì)照組、DSS（3％w/v）組、DSS+ATRA（100μg）組和DSS+ATRA（500μg）組。正常對(duì)照組小鼠飲用實(shí)驗(yàn)室中的正常飲用水，其余三組小鼠飲用含3%(w/v) DSS的飲用水，從小鼠飲用DSS第1天開始，DSS+ATRA100μg組、DSS+ATRA500μg組分別給予ATRA100μg/d

3、、500μg/d灌胃7天至實(shí)驗(yàn)結(jié)束．空白對(duì)照組及DSS組每天給予同等體積的玉米油灌胃，第8天戊巴比妥鈉麻醉，處死所有小鼠，收集小鼠腸道樣本，用于病理學(xué)檢測(cè)、髓過氧化物酶活性（MPO）的檢測(cè)、實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、RAR-α、RXR-α的表達(dá)、免疫印跡法（Western blot）檢測(cè)RAR-α、RXR-α的表達(dá)。小鼠的巨噬細(xì)胞系RAW264.7培養(yǎng)于含10%胎牛血

4、清的DMEM培養(yǎng)基中（100kU. L-1青霉素、100kU. L-1鏈霉素）中，先給予不同濃度的ATRA干預(yù)1h后，再給予LPS刺激，培養(yǎng)24h后收集細(xì)胞。RT-PCR檢測(cè)TNF-α、IL-1β、IL-6、RAR-α、 RXR-α的表達(dá)、Western blot檢測(cè)RAR-α、 RXR-α的表達(dá)。
　　結(jié)果：在潰瘍性結(jié)腸炎患者、小鼠結(jié)腸炎模型及LPS刺激的巨噬細(xì)胞中，RAR-α及RXR-α在基因及蛋白水平的表達(dá)均下調(diào)，且RAR-

5、α及RXR-α表達(dá)的下調(diào)伴隨有炎癥因子表達(dá)的上調(diào)。給予維甲酸干預(yù)后，LPS刺激的巨噬細(xì)胞及小鼠結(jié)腸炎模型中的炎癥因子表達(dá)水平下降，且RAR-α的表達(dá)水平增高；RXR-α在體內(nèi)試驗(yàn)中表達(dá)也增加，在體外實(shí)驗(yàn)中表達(dá)卻進(jìn)一步減少。
　　結(jié)論：RAR-α、RXR-α在小鼠結(jié)腸炎模型及潰瘍性結(jié)腸炎患者結(jié)腸組織中的表達(dá)的下降提示RAR-α、RXR-α可能與潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病有關(guān)，且ATRA可能通過誘導(dǎo)RAR-α、RXR-α受體表達(dá)的增加來緩解小