MMP-7及MMP-19在膽道閉鎖幼鼠動物模型肝臟組織中的表達.pdf

1、目的:膽道閉鎖于亞洲地區(qū)發(fā)病率高，目前國內(nèi)采用Kasai手術緩解膽汁淤積。雖然外科干預可以有效緩解患兒膽汁排出不暢，但并不能阻止BA患兒進行性肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展。膽道閉鎖患兒自體肝的20年生存率為21％-44％，而且多數(shù)長期生存的患兒均有不同程度相關并發(fā)癥的發(fā)生。最終，膽道閉鎖Kasai手術后患兒均需通過肝移植獲得長期存活，但生存質(zhì)量令人堪憂，給社會和家庭都帶來巨大打擊。肝纖維化是多種病因所致肝內(nèi)結締組織異常增生，肝內(nèi)彌漫性細胞外基質(zhì)

2、過度沉淀的病理過程。目前認為，肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的，而肝硬化則是難以逆轉(zhuǎn)。如果可以阻斷、減緩乃至逆轉(zhuǎn)肝纖維化，就能很大程度地改善肝病的預后及預防肝硬化的發(fā)生。
　　本研究以膽道閉鎖幼鼠模型為研究對象，利用免疫組織化學染色方法、蛋白質(zhì)印記法等研究MMP-7和MMP-19在不同纖維化程度肝臟組織中表達和分布情況。探討二者在膽道閉鎖肝纖維化中的作用機制。
　　研究方法:
　　一、標本制備及分組: WISTAR出生3天小鼠，隨

3、機分組為實驗組，對照組。實驗組于全麻下行膽總管結扎術，對照組于全麻下行開腹及關腹
　　二、實驗技術
　　應用免疫組織化學方法、蛋白印記法及RT-PCR分別檢測MMP-7及MMP-19在對照組和病例組肝臟組織標本中的分布和表達情況。
　　三、數(shù)據(jù)分析
　　采用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量數(shù)據(jù)以(x)±s表示，數(shù)值比較采用t檢驗分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　1.MMP-

4、7
　　免疫組化:3d、7d、14d、21d、28d中MMP-7實驗組表達高于對照組。WB:3d、7d、21d、28d中MMP-7在實驗組的表達均高于對照組。14d組中MMP-7無明顯差異。RT-PCR: MMP-7在3d、7d、21d、28d幼鼠肝臟組織中實驗組表達均高于對照組，且P值＜0.05，結果具有統(tǒng)計學意義;MMP-7在14d組中實驗組與對照組P=0.05，結果不具統(tǒng)計學意義。
　　2.MMP-19
　　免疫

5、組化:3d、7d、14d、21d、28d中MMP-19實驗組表達低于對照組。WB:3d、7d、14d、21d、28d中MMP-19實驗組表達低于對照組，且以14d表達為最明顯。RT-PCR:MMP-19在3d、7d、14d、21d、28d幼鼠肝臟組織中實驗組表達均低于對照組，且P值均P＜0.05，結果具有統(tǒng)計學意義
　　結論:
　　1.MMP-7及MMP-19在膽道閉鎖肝纖維化模型中表達差異明顯。
　　2.MMPs參與