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文檔簡介
1、本文以芹菜和花椰菜為研究對象,利用加速溶劑萃取法(ASE)及大孔吸附樹脂對其所含黃酮進行提取和純化,建立了HPLC-ESI-MSn分離鑒定黃酮的方法,并對芹菜和花椰菜中的黃酮進行了鑒定。
通過單因素和正交實驗,確定了芹菜黃酮的最佳提取工藝條件:預(yù)熱時間:5 min,靜態(tài)萃取時間:5 min,萃取壓力:10.3 MPa,萃取溫度:90℃,萃取劑:80%乙醇水溶液,沖洗體積:60%,N2吹掃時間:60s,循環(huán)3次。
研究
2、了大孔樹脂純化芹菜黃酮的工藝條件,通過比較AB-8型、D101型、D4020型和NKA-9型4種樹脂對芹菜黃酮的吸附、解吸附性能,最終選擇D101型大孔樹脂純化芹菜黃酮,工藝條件為:黃酮上樣量與所用干樹脂的比例約為1.4 mg/g,洗脫劑:80%乙醇水溶液,收集4倍柱體積(BV)的洗脫溶液。
實驗優(yōu)化了液相色譜部分和質(zhì)譜部分的各項儀器參數(shù),建立了黃酮的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分離鑒定方法。色譜柱型號為ZORBAX Eclipse XD
3、B-C18(2.1 mm×150 mm,3.5μm Agilent);柱溫為40℃;流速為0.2 mL/min;流動相為甲醇(B)和含0.1%甲酸的水(A);梯度洗脫條件如下:0-20 min20%-30% B;20-30 min30%-40% B;30-55 min40%-55% B;55-65 min55% B;65-66 min55%-20%B;66-76 min20%B,二極管陣列檢測器(PDA)全掃描波長為230-500 nm
4、。離子源為ESI源;金屬毛細管溫度為300℃;金屬毛細管電壓為-15V;電噴霧電壓為4.5 kV;鞘氣流速為30 arb;輔助氣流速為5arb。
芹菜葉、芹菜莖和花椰菜葉黃酮的提取量分別為14.53 mg/g,1.80 mg/g,6.35 mg/g。經(jīng)過D101大孔樹脂純化的黃酮粉末的純度為66.42%,而未經(jīng)大孔樹脂純化的黃酮粉末的純度為25.03%。加標回收率在95%-108%的范圍內(nèi)。根據(jù)黃酮標準品在高效液相色譜中的保留
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