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1、<p> 微波輔助提取香椿葉中黃酮成分工藝研究</p><p> 摘要:對(duì)微波輔助條件下乙醇溶液提取香椿葉中黃酮成分進(jìn)行了研究,以總黃酮提取量為考察目標(biāo),綜合單因素影響確定通過(guò)L9(34)正交實(shí)驗(yàn)初步確定最佳提取工藝條件為:甲醇濃度50%,微波頻率取700 W,料液比1∶25,回流25 min,獲得的黃酮提取收率5.34%。 </p><p> 關(guān)鍵詞:香椿;黃酮;微波;提
2、取工藝 </p><p> 中圖分類(lèi)號(hào):O629.9 </p><p> 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-9944(2016)20-0120-02 </p><p><b> 1 引言 </b></p><p> 香椿,其春季所發(fā)嫩芽是傳統(tǒng)的菜肴,不但營(yíng)養(yǎng)豐富還具有食療保健作用,具有瀉毒下火、保護(hù)肝臟、抵抗炎
3、癥、降低血壓、解除痙攣等多種生理活性功效[1~3]。經(jīng)現(xiàn)代科學(xué)研究,香椿樹(shù)嫩葉中富含具有廣泛生物活性和重要藥用價(jià)值的黃酮類(lèi)化合物,其提取物具有抗氧化、抗菌、抵抗炎癥、降壓、抗癌等多種生理活性功效藥理作用[4~7]。但是,目前香椿在秋季落葉的利用研究極少,擬在傳統(tǒng)的熱回流提取工藝之上對(duì)微波輔助提取香椿老葉中黃酮的工藝進(jìn)行研究[8],豐富香椿老葉黃酮提取的工藝方法,將為香椿老葉黃酮成分提取及分析的相關(guān)研究奠定理論基礎(chǔ)。 </p>
4、<p><b> 2 實(shí)驗(yàn)部分 </b></p><p> 2.1 儀器與試劑 </p><p> 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑有:UV2550紫外分光光度計(jì)(日本島津),蘆丁分析標(biāo)準(zhǔn)品(阿拉?。?,香椿(秋后老葉,達(dá)州萬(wàn)源),其余試劑均為分析純。 </p><p> 2.2 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 </p><p>
5、 精密稱(chēng)取蘆丁分析標(biāo)準(zhǔn)品20.0 mg,使用30%乙醇溶解并定容至100 mL制備的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)貯備液(0.2 mg/mL)。準(zhǔn)確移取0,1.0 mL, 2.0 mL, 4.0 mL, 6.0 mL, 8.0 mL, 10.0 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至7支25 mL容量瓶中。然后分別先加30%乙醇至體積一半,后加入0.7 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的亞硝酸鈉溶液,搖勻后放置5 min,再分別加入0.7 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的硝酸鋁溶液,搖勻后放置5 mi
6、n,最后加入1 mol/L的氫氧化鈉溶液5 mL并用30%的乙醇定容至刻度,放置10 min。以未添加蘆丁儲(chǔ)備液的溶液為空白,在510 nm測(cè)定吸光度值,以吸光度Y為縱坐標(biāo),黃酮濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1)。 </p><p> 2.3 香椿老葉黃酮的提取與含量測(cè)定 </p><p> 將香椿老葉去梗后放入干燥箱內(nèi)30℃干燥至恒重,經(jīng)中藥粉碎機(jī)粉碎后放入干燥器備用。準(zhǔn)確稱(chēng)取1.0
7、0 g 香椿葉粉末移入燒瓶中,加入一定量的乙醇溶液,在一定的微波功率和一定的溫度下提取一定的時(shí)間,將提取液減壓抽濾除去濾渣,轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶并用30%乙醇定容至刻度,搖勻。取10 mL定容后溶液的于轉(zhuǎn)子中,用離心機(jī)以10000 r/min的速度離心5 min,精確量取4 mL離心后的上層清液于25 mL容量瓶,再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的Na(NO2)溶液0.7 mL,搖勻使其充分反應(yīng)后等待5 min,然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的Al(
8、NO3)3溶液0.7 mL,搖勻使其充分反應(yīng)后等待5 min,然后加入1 mol/L的NaOH溶液5 mL混勻使其充分反應(yīng),最后用30%的乙醇定容至刻度,放置10 min作為待測(cè)溶液測(cè)其吸光度。 </p><p><b> 2.4 正交試驗(yàn) </b></p><p> 2.4.1 正交試驗(yàn)因素水平 </p><p> 利用提前對(duì)微波輔助下
9、提取香椿葉中的黃酮成分進(jìn)行了單因素實(shí)驗(yàn)計(jì)算后,確立了以乙醇水溶液濃度、微波輻射功率、微波輻射時(shí)間、料液比4個(gè)因素,每個(gè)因素3個(gè)水平,進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn)(表1);將總黃酮提取率為最后考察指標(biāo),結(jié)合實(shí)際情況確定最佳提取工藝。 </p><p> 2.4.2 正交試驗(yàn)結(jié)果 </p><p> 按上述因素與水平設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案,并進(jìn)行正交試驗(yàn),結(jié)果如表2所示。 </p><
10、;p> 由表2可知,各因素的極差大小關(guān)系為RA>RB>RC>RD ,因此各因素對(duì)香椿葉總黃酮提取的影響順序?yàn)锳>B>C>D,即乙醇濃度>微波功率>微波時(shí)間>料液比,乙醇濃度的極差為0.194,影響程度最大;料液比極差為0.035,影響程度最小。綜合以上各因素的影響,確定提取香椿葉中黃酮成分的最佳工藝為即乙醇濃度50%,微波頻率700 W,微波時(shí)間25 min,料液比1∶25。
11、 </p><p><b> 3 結(jié)果與討論 </b></p><p> 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果上看,乙醇濃度、微波功率、微波輻射時(shí)間、料液比幾個(gè)因素對(duì)香椿葉中黃酮成分的提取都有著明顯的影響。根據(jù)正交試驗(yàn)我們確定最佳提取工藝條件為乙醇濃度50%,微波頻率700 W,微波時(shí)間25 min,料液比1∶25。經(jīng)在最佳工藝條件下提取驗(yàn)證黃酮提取率為5.34%,我們對(duì)香椿葉提取物經(jīng)過(guò)一
12、次D101大孔樹(shù)脂純化富集后黃酮含量即可達(dá)26.7%,經(jīng)高效液相色譜對(duì)其成分分析表明組分簡(jiǎn)單且主要成分集中,這些表明了香椿老葉黃酮成分的后續(xù)開(kāi)發(fā)利用具有很好的前景。 </p><p><b> 參考文獻(xiàn): </b></p><p> [1]裴宋雨,任志勇,焦振彬,等.香椿微衛(wèi)星富集文庫(kù)構(gòu)建及特性分析[J].種子,2015,34(2): 13~16. </p&
13、gt;<p> [2]郝繼偉.淺談虎目葉的資源價(jià)值與利用[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2003(5):102~103. </p><p> [3]李曙軒.中國(guó)農(nóng)業(yè)百科全書(shū)-蔬菜卷[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1990. </p><p> [4]張仲平,牛 超,孫 英.虎目葉黃酮類(lèi)成分的分離與鑒定[J].中藥材,2001,24(10):725~726. </p>&l
14、t;p> [5]田迪英,楊榮華.虎目葉的抗菌作用研究[J].食品工業(yè)科技,2002,23(11):21~22. </p><p> [6]張京芳,王冬梅,周 麗,等. 虎目葉抗氧化物提取工藝優(yōu)化與抗氧化活性分析[J]. 農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報(bào), 2007,38(8):97~100. </p><p> [7]曹瑋國(guó),劉志勤,邵云.黃酮類(lèi)化合物藥理作用的研究進(jìn)展[J].西北植物學(xué)報(bào),200
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