蜂膠中黃酮的提取及應(yīng)用研究.pdf

1、本論文主要對(duì)蜂膠中黃酮的提取、測(cè)定、分離、產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)應(yīng)用以及產(chǎn)品的毒性、功能性進(jìn)行了研究，主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 采用超聲波法提取蜂膠中的黃酮，通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到了超聲波提取的最佳工藝條件：乙醇濃度95％、溫度35℃、固液比1：10、提取時(shí)間20min。采用超臨界CO<,2>萃取蜂膠中有效成分，以萃取率為指標(biāo)，得到了蜂膠有效成分萃取的最佳條件為萃取壓力 30Mpa，萃取溫度55℃，CO<,2>流量50kg/h，萃取時(shí)間4小時(shí)，萃取率最高達(dá)

2、到37.50％。乙醇提取蜂膠中黃酮的最佳工藝為：乙醇濃度95％、固液比1：8、提取時(shí)間24小時(shí)、提取溫度25℃，采用160-200目磷酸型活性炭在60℃下攪拌1h脫鉛，采用-18℃冷凍8h后過(guò)濾除蠟，得到的蜂膠提取物鉛含量在0.4ppm以下，蜂蠟含量在0.2％以下。 采用三種分光光度比色法和 HPLC 法對(duì)乙醇提取物和超臨界CO<,2>萃取物中的黃酮進(jìn)行比較測(cè)定，得到415nm比色法的結(jié)果為 5341mg/100g-8080mg

3、/100g和1990mg/100g-2316mg/100g在四種方法中測(cè)得的結(jié)果最低，不符合測(cè)定要求，360nm 比色法高于HPLC法較為合理。510nm 比色法測(cè)定的乙醇浸泡提取物中黃酮的結(jié)果最高為 41388mg/100g-45998 mg/100g，但是超臨界CO<,2>萃取物中的黃酮為 6752-7667mg/100g?？紤]到保健食品的競(jìng)爭(zhēng)性最終確定 510nm 比色法為測(cè)定蜂膠產(chǎn)品黃酮含量的方法。通過(guò)對(duì)蜂膠乙醇提取物和超臨界

4、CO<,2>萃取物的GC-MS黃酮成分統(tǒng)計(jì)分析得出總共測(cè)出 11 種黃酮，蜂膠乙醇提取物中含有9種，相對(duì)含量為 39.73％，超臨界CO<,2>萃取物中6種，相對(duì)含量為 25.32％，其中4種為兩者共有。 采用較低濃度酒精溶液分離蜂膠中較強(qiáng)極性的黃酮類(lèi)物質(zhì)的小試得率為22.5％，中試得率在20％以上，該方法能夠富集部分黃酮，為開(kāi)發(fā)高黃酮含量的蜂膠保健食品提供了原料。采用冷凍、結(jié)晶、過(guò)濾、溶解、重結(jié)晶的方法處理蜂膠乙醇提取物，能夠

5、分離得到較高含量的黃酮類(lèi)化合物，經(jīng)過(guò)紅外光譜和液相色譜定性、定量分析得出此類(lèi)化合物中的柯因純度較高。公司在生產(chǎn)過(guò)程中常常發(fā)現(xiàn)蜂膠軟膠囊內(nèi)容物或蜂膠液產(chǎn)品中有黃色的沙狀物質(zhì)，通過(guò)該分離和鑒定方法，可以確定該黃色的沙狀物質(zhì)的成分。 采用蜂膠分離物進(jìn)行了蜂膠新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到人參蜂膠液的最佳配方為7.5％蜂膠乙醇提取物，4％的人參提取物，30％PEG400，58.5％的75％的食用酒精；高含量蜂膠軟膠囊的最佳配方為：蜂膠乙醇提

6、取物 30％，PEG40050.5％，甘油 14.5％，純化水5％；油溶蜂膠軟膠囊的最佳配方為蜂膠乙醇提取物20％，大豆油61％，蜂蠟6.5％，卵磷脂2.5％，淀粉10％。并且采用此配方進(jìn)行中試，對(duì)中試的三批樣品置于38℃和相對(duì)濕度75％的環(huán)境中連續(xù)觀察三個(gè)月，其功效成分和衛(wèi)生學(xué)等指標(biāo)均符合穩(wěn)定要求。人參蜂膠液急性毒理試驗(yàn)LD<,50>均大于20ml/kgBW，屬無(wú)毒級(jí)。三項(xiàng)遺傳毒性試驗(yàn)的Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)和小鼠