pH敏感聚乙二醇-聚乳酸-聚（β-氨基酯）聚合物膠束載紫杉醇性能研究.pdf

1、目的:
　　紫杉醇（Paclitaxel，PTX，商品名Taxol）具有微管穩(wěn)定作用，抑制細(xì)胞有絲分裂，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，是一種高效的細(xì)胞毒類藥物。紫杉醇早在1992年就通過了美國國家食品藥品管理中心的批準(zhǔn)，成為晚期卵巢癌、乳腺癌的治療藥物，現(xiàn)在，紫杉醇也成功地應(yīng)用于治療包括非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、卡波氏肉瘤在內(nèi)的多種惡性腫瘤，成為世界抗癌首選藥物。
　　紫杉醇的理化性質(zhì)表明，其在水中溶解度約0.25 mg·L-1，脂溶性強(qiáng)，因此

2、紫杉醇的低溶解度成為其廣泛應(yīng)用的限制因素之一。臨床應(yīng)用的主要是紫杉醇注射液，即用聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)/無水乙醇(v/v，50∶50)作為溶劑。但是大量臨床數(shù)據(jù)表明，紫杉醇注射液中的聚氧乙烯蓖麻油易引起過敏反應(yīng)、腎毒性、神經(jīng)毒性等，因此，極大地限制了紫杉醇的臨床應(yīng)用。
　　基于上述原因，為提高其水溶性及靶向性，降低毒副作用，本文以聚乙二醇-聚乳酸(PELA)-聚-β-氨基酯(PBAE)三嵌段聚合物為載體材料，當(dāng)

3、聚合物的濃度在臨界膠束濃度(CMC)以上時(shí)，在水性溶劑中會(huì)自組裝形成以聚乳酸為疏水內(nèi)核，聚乙二醇為親水性外殼的納米膠束，疏水性藥物紫杉醇增溶在疏水性內(nèi)核部分。聚-β-氨基酯在弱酸性條件鏈段舒展，膠束結(jié)構(gòu)破壞，快速釋放藥物，從而實(shí)現(xiàn)藥物在腫瘤組織快速靶向釋放。
　　方法:
　　本課題內(nèi)容包括pH敏感兩親性三嵌段聚合物PBAE的制備、載藥性能的研究、體外細(xì)胞毒性評價(jià)和載藥膠束體內(nèi)分布特性評價(jià)。
　　(1)邁克爾加成(Mic

4、hael addition)合成PBAE共聚物，通過核磁共振波譜法表征其結(jié)構(gòu)和相對分子質(zhì)量，酸堿滴定法測定其堿解離常數(shù)(dissociation contant，pKb)，熒光法測定臨界膠束濃度(critical micelle concentration，CMC)。
　　(2)采用薄膜水化法制備載紫杉醇納米膠束，HPLC測定載藥量和包封率，激光粒度儀測定粒徑及分布，透射電鏡表征其形態(tài)，透析袋透析法測定納米膠束在不同pH條件下的釋

5、放特性。
　　(3)采用MTT法比較PBAE和PELA在不同pH條件下對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞體外生長及增殖的影響。
　　(4)載藥膠束小鼠體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)采用尾靜脈注射給藥，評價(jià)紫杉醇注射液、PELA-PTX、PBAE-PTX在小鼠血漿和組織內(nèi)的分布特性。
　　結(jié)果:
　　(1) PELA和PBAE的pKb分別為7.1和6.5，CMC分別為3.31，4.79 mg·L-1。PBAE具有較低的臨界膠束濃度和明顯的pH

6、響應(yīng)特性。
　　(2) PELA和PBAE兩種膠束對紫杉醇的載藥量分別為12.37％和12.05％，包封率分別為70.55％和68.53％，且紫杉醇膠束溶液1周內(nèi)穩(wěn)定。體外釋放實(shí)驗(yàn)表明，非pH響應(yīng)材料PELA隨介質(zhì)pH降低，無明顯pH響應(yīng)特性;而pH敏感材料PBAE在弱酸性條件下藥物釋放速率明顯加快，總藥物釋放量也增大。
　　(3)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明，PELA和PBAE兩種材料不同pH條件下在制劑使用濃度范圍內(nèi)對MCF-7人乳

7、腺癌細(xì)胞均無毒，在高濃度范圍內(nèi)， PELA和PBAE毒性隨pH降低稍有變化，pH響應(yīng)性材料PBAE對細(xì)胞毒性的影響稍大。
　　(4)紫杉醇注射液在血漿和各組織中的藥物蓄積量由高到低順序?yàn)?肝＞脾＞肺＞腎＞心＞血，而PELA-PTX在血漿和各組織中的藥物蓄積量順序?yàn)?肺＞肝＞腎＞脾＞心＞血，PBAE-PTX為:肺＞肝＞腎＞心＞脾＞血，PELA-PTX、PBAE-PTX具有一定長循環(huán)效果和相對較低的肝腎蓄積效應(yīng)。
　　結(jié)論: