一種定量分析雙歧桿菌的新方法.pdf

1、作為人和溫血動物體內最重要的益生菌，雙歧桿菌對宿主顯示了多方面的促進健康作用。目前市場上以含有雙歧桿菌的混合菌產品居多，而目前對該類產品卻沒有一個準確的檢測方法。 本文旨在建立一種新的雙歧桿菌定量分析技術。論文首先建立了雙歧桿菌的培養(yǎng)體系，兩歧雙歧桿菌的培養(yǎng)結果顯示：BBL瓊脂培養(yǎng)基和TPY液體培養(yǎng)基對兩歧雙歧桿菌的培養(yǎng)效果較好，作為兩歧雙歧桿菌的培養(yǎng)基。然后進行了雙歧桿菌屬特征性酶F6PPK測定條件的優(yōu)化。試驗首先改良了原初文

2、獻(Scardovi法)F6PPK酶活測定中對照反應管的設置，又對雙歧桿菌培養(yǎng)時間、細胞破碎方法、底物濃度、比色波長、反應溫度與時間等條件進行了優(yōu)化。結果表明，雙歧桿菌培養(yǎng)18h，收集茵體，以超聲波法破碎細胞制備粗酶液，采用4％的底物濃度，將粗酶液與底物于40℃保溫30min，最終反應物于500nm比色，所得F6PPK酶活測定結果更可靠。 在獲得優(yōu)化的F6PPK酶活力測定條件的基礎上，通過培養(yǎng)不同的時間來獲取不同數(shù)量的菌體，用厭