共振光散射新方法定量分析蛋白質(zhì).pdf

1、共振光散射(RLS)光譜法二十世紀(jì)90年代發(fā)展起來的一種分析測試新技術(shù)。1995年，共振光散射技術(shù)作為一種研究生色團(tuán)聚集的方法被Pasternack正式提出。隨著共振光散射技術(shù)在理論和分析方法上的日趨成熟，共振光散射技術(shù)以其簡單的操作，較高的靈敏度廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)、核酸、藥物、細(xì)胞、金屬離子、非金屬離子、納米粒子和表面活性劑等的分析。共振光散射法與一般的熒光法相比有更高的靈敏度，可以用于稀溶液的研究；檢測更為方便，并可研究共振光散射光譜

2、特征；可為研究分子結(jié)構(gòu)和反應(yīng)特征提供更豐富的信息；共振瑞利散射對于大分子非鍵作用，如締合、聚集、偶極-偶極作用、長距離組裝非常敏銳，這對于生物大分子的測定、表征及反應(yīng)歷程的研究極為有利。但是共振光技術(shù)還存在著不足之處，譬如抗干擾能力不強(qiáng)，其共振光散射信號易受到外來共存物質(zhì)的干擾；重現(xiàn)性不好；油溶性試劑中使用不便等。 本論文在總結(jié)前人工作基礎(chǔ)上，對共振光散射法測定蛋白質(zhì)進(jìn)行了創(chuàng)新性的研究： 1、將自行組裝的流動注射裝置與熒

3、光光譜儀聯(lián)用，確立了流動注射.共振光散射聯(lián)用測定人血清樣品中蛋白質(zhì)含量的新方法，提高了共振光散射技術(shù)的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。 2、建立了聚乙二醇辛基苯基醚-蛋白質(zhì)-亮麗春紅5R三元體系檢測人血清中蛋白質(zhì)含量的新方法，提高了檢測的靈敏度。 論文共分為三章： 第一章：簡要介紹了共振光散射技術(shù)的原理和應(yīng)用，以及共振光散射分析新方法的發(fā)展。并且對實驗中用到的表面活性劑的在共振光散射檢測中的應(yīng)用進(jìn)行了簡單綜述。 第二章：

4、用十二烷基硫酸鈉作為探針，在流動注射.共振光散射聯(lián)用系統(tǒng)中在線測定人血清中蛋白質(zhì)的含量。該體系對人血清白蛋白檢測的線性范圍在3.0-28.0μg/mL之間，檢測限為70ng/mL，檢測結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于2.12％，樣品回收率在97.83-106.09％之間。該方法克服了不穩(wěn)定體系重現(xiàn)性較差的缺點，分析速度快，靈敏度高，實現(xiàn)了蛋白質(zhì)的在線檢測。 第三章：基于在pH2.11的酸性溶液中，聚乙二醇辛基苯基醚(OP)對亮麗春紅5R